PerCP/Cyanine5.5 Kaninchen anti-Human/Affe CD45 monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P08575

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD45-Funktion und -Lokalisierung

• CD45, auch bekannt als Leukozyten-common-Antigen (L-CA) oder T200, ist ein Rezeptor-Tyrosin-Proteinphosphatase C, der vom PTPRC-Gen kodiert wird. Mehrere Isoformen entstehen durch alternatives Spleißen, mit Molekulargewichten von ca. 131 bis 147 kDa.
• CD45 ist für die T-Zell-Aktivierung über den Antigenrezeptor unerlässlich und wirkt als positiver Regulator der Koaktivierung nach Bindung an DPP4. Es rekrutiert und dephosphoryliert SKAP1 und FYN und moduliert die LYN-Aktivität (PubMed:35767951). Verwandte Referenzen: PMID:35767951
• Es fungiert als Proteintyrosinphosphatase, wobei die erste PTPase-Domäne enzymatische Aktivität zeigt und die zweite Domäne die Substratspezifität beeinflusst.
• CD45 interagiert an der antigenpräsentierenden Zelle–T-Zell-Kontaktstelle mit CLEC10A, wobei CLEC10A auf unreifen dendritischen Zellen das Tn-Antigen-tragende CD45 auf Effektor-T-Zellen erkennt und den Schwellenwert für die T-Zell-Aktivierung moduliert, um Autoimmunität zu begrenzen.
• Während einer Cytomegalievirus-Infektion dient CD45 als Rezeptor für das virale Protein UL11, vermittelt die Bindung an T-Zellen und führt zu einer reduzierten Tyrosinphosphorylierung von Signalproteinen sowie einer beeinträchtigten T-Zell-Proliferation.
• Es lokalisiert sich an der Zellmembran, den Membranrafts und der immunologischen Synapse, was seiner Rolle bei der Signalübertragung entspricht.
• CD45 ist ein Glykoprotein und Phosphoprotein mit wichtigen Rollen bei der Wirt-Virus-Interaktion, und Mutationen sind mit SCID (schwerer kombinierter Immundefizienz) assoziiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das die Aminosäuren 26-577 von humanem CD45 (P08575) umfasst. Diese extrazelluläre Domäne wird häufig für Anwendungen der Durchflusszytometrie angezielt; berücksichtigen Sie dies bei der Gestaltung Ihres Färbungs-Panels.
• Titrieren Sie für die Durchflusszytometrie den Antikörper, um die optimale Färbe-Konzentration zu bestimmen. Verwenden Sie geeignete Isotyp-Kontrollen und Viabilitätsfarbstoffe. Da CD45 auf allen hämatopoetischen Zellen exprimiert wird, werden sorgfältige Gating-Strategien empfohlen, um Leukozyten-Subsets zu unterscheiden.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit menschlichem und Javaneraffen (Cynomolgus) CD45. Validieren Sie bei der Arbeit mit Proben von Javaneraffen das Färbemuster im entsprechenden Proben-system, um die Reaktivität und Spezifität zu bestätigen.
• Es existieren mehrere Isoformen von CD45 (131-147 kDa), und der Antikörper kann je nach Epitop-Lage verschiedene Isoformen erkennen. Wenn eine isoformspezifische Detektion erforderlich ist, bestätigen Sie die Erkennung per Western Blot oder antigenischer Analyse.

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