PerCP/Cyanine5.5 Kaninchen-anti-human-CD94-monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie – Q13241

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD94

• CD94 (KLRD1) ist ein Transmembranrezeptor vom C-Typ-Lektin-ähnlichen Typ, der mit NKG2A (KLRC1) oder NKG2C (KLRC2) Disulfid-verknüpfte Heterodimere bildet. Diese Komplexe erkennen das nicht-klassische MHC-Klasse-I-Molekül HLA-E, das Selbstpeptide präsentiert, und ermöglichen es Immunzellen, die Expression von MHC-Klasse-I zu überwachen. Zugehörige Referenzen: PMID:10023772, PMID:18064301, PMID:18083576, PMID:12387742, PMID:9430220

• Das KLRD1-KLRC1-Heterodimer fungiert als inhibitorischer Rezeptor. Auf NK-Zellen rekrutiert es über ITIM-Motive Tyrosinphosphatasen und dämpft dadurch Aktivierungssignale. Auf CD8+-T-Zellen wirkt es dem TCR-Signal entgegen und fördert die Erschöpfung in HLA-E-reichen Tumormikroumgebungen. Zugehörige Referenzen: PMID:30860984, PMID:9430220, PMID:9485206, PMID:12387742, PMID:18064301, PMID:30503213, PMID:12165520

• Das KLRD1-KLRC2-Heterodimer wirkt dagegen als aktivierender Rezeptor. Es erkennt HLA-E, das von HLA-G abgeleitete Peptide präsentiert, und vermittelt adaptive NK-Zell-Reaktionen auf Virusinfektionen sowie die Toleranz zwischen Mutter und Fötus. Die Signalübertragung erfolgt über das Adapterprotein DAP12 und führt zu Phosphorylierung und Zellaktivierung. Zugehörige Referenzen: PMID:15940674, PMID:9655483, PMID:30134159, PMID:9754572, PMID:20952657, PMID:21825173

• CD94 wird auf der Plasmamembran von NK-Zellen, Gedächtnis-/Effektor-CD8+-αβ-T-Zellen, γδ-T-Zellen und bestimmten tumorspezifischen zytotoxischen T-Lymphozyten exprimiert. Das Expressionsmuster inhibitorischer gegenüber aktivierenden Rezeptorkomplexen variiert zwischen den Lymphozyten-Subpopulationen.

• Während einer SARS-CoV-2-Infektion kann das Peptid des viralen Spike-Proteins von HLA-E präsentiert werden und KLRD1-KLRC1 binden. Dies führt zur funktionellen Erschöpfung zytotoxischer NK-Zellen und CD8+-T-Zellen und beeinträchtigt dadurch die antivirale Immunüberwachung. Zugehörige Referenz: PMID:32859121

• CD94 ist ein Transmembran-Glykoprotein mit einer Einzelpassage-Orientierung vom Typ II (Signalanker), enthält eine C-Typ-Lektin-ähnliche Domäne und weist eine Disulfidbindung auf. Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 32–179 des humanen CD94 und repräsentiert die extrazelluläre C-Typ-Lektin-ähnliche Domäne. Dieses Domänendesign deutet darauf hin, dass der Antikörper möglicherweise gefaltetes natives CD94 auf der Zelloberfläche erkennt, wodurch er für Anwendungen in der Durchflusszytometrie geeignet ist.
• Für die Durchflusszytometrie sollte der Antikörper titriert werden, um die optimale Konzentration für den jeweiligen Probentyp zu bestimmen. Geeignete Isotypkontrollen sollten eingeschlossen und gegebenenfalls eine Blockierung von Fc-Rezeptoren in Betracht gezogen werden, um die unspezifische Bindung zu reduzieren.
• Da der Antikörper direkt an PerCP/Cyanine5.5 konjugiert ist, kann er unmittelbar in Mehrfarben-Panels eingesetzt werden. Die Kompatibilität mit der Laser- und Filterkonfiguration des verwendeten Instruments sollte überprüft und bei Bedarf eine Kompensation durchgeführt werden.
• Für den Antikörper wurde eine Kreuzreaktivität mit humanem CD94 berichtet. Der Assay sollte in relevanten humanen Zelllinien oder primären NK-/T-Zellpopulationen validiert werden, um die Reaktivität im jeweiligen experimentellen System zu bestätigen.

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