PerCP-Konjugierter Kaninchen-Anti-Human/Affe CD45 Monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie - P08575

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD45 (Rezeptortyrosin-Proteinphosphatase C) Funktion und Lokalisierung

• Fungiert als Protein-Tyrosin-Phosphatase, die für die T-Zell-Aktivierung über den Antigenrezeptor erforderlich ist, wie durch genetische Studien belegt. Es reguliert die T-Zell-Koaktivierung positiv nach Bindung an DPP4 und dephosphoryliert nachgeschaltete Effektoren einschließlich SKAP1, FYN und LYN. Verwandte Referenzen: PMID:35767951
• Wirkt als Rezeptor für das humane Zytomegalievirus (HCMV)-Protein UL11, vermittelt die Bindung von UL11 an T-Zellen. Diese Interaktion dämpft die T-Zell-Rezeptor-Signalgebung, reduziert die Tyrosinphosphorylierung und beeinträchtigt die T-Zell-Proliferation.
• Primär in der Zellmembran lokalisiert, mit Anreicherung in Membranrafts und an der immunologischen Synapse, was seine Rolle in der Signaltransduktion erleichtert.
• Mehrere Isoformen entstehen durch alternatives Spleißen von PTPRC. Die Isoformen 1, 2, 3, 5 und 7 werden in Thymozyten nachgewiesen, während die Isoformen 4, 6 und 8 fehlen, was streng regulierte isoform-spezifische Expressionsmuster anzeigt.
• CD45 ist ein stark glykosyliertes Single-Pass Typ I Transmembranprotein mit einem vorhergesagten Molekulargewicht von etwa 147 kDa, obwohl nachgewiesene Isoformen von 131 bis 147 kDa reichen. Es enthält zwei intrazelluläre Phosphatasedomänen und gehört zur Familie der Protein-Tyrosin-Phosphatasen.
• Klassifiziert unter Schlüsselwörtern wie alternatives Spleißen, Glykoprotein, Phosphoprotein, Synapse, Wirt-Virus-Interaktion und SCID-bezogene Krankheitsvariante, was seine vielseitigen Rollen widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen entspricht den Aminosäuren 26-577 von humanem CD45 und deckt eine große extrazelluläre Region ab. Dieses Design begünstigt den Nachweis von oberflächenexprimiertem CD45 in lebenden, unfixierten Zellen, was es gut für Durchflusszytometrie-Anwendungen geeignet macht.
• Als PerCP-Konjugat ist die spektrale Überlappung mit PE, PE-Cy5 und Tandemfarbstoffen in Mehrfarben-Panels zu berücksichtigen. Verwenden Sie geeignete Kompensationskontrollen und titrieren Sie den Antikörper für ein optimales Signal-Rausch-Verhältnis.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Cynomolgus CD45; validieren Sie die Färbemuster unter Verwendung relevanter positiver (z.B. humane PBMCs, Cynomolgus-Blutlymphozyten) und negativer (z.B. CD45-negative Zelllinien) Kontrollen.
• Für T-Zell-Studien beachten Sie, dass die Isoformexpression zwischen T-Zell-Subsets und Differenzierungsstadien variiert. Kombinieren Sie mit linien-spezifischen Markern, um Populationen genau zu gaten.

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