PerCP anti-Maus CD45 (Ptprc) Monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P06800

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD45-Funktion und -Lokalisierung

• CD45 (Rezeptor-Tyrosin-Proteinphosphatase Typ C), codiert durch das Ptprc-Gen, ist ein Transmembran-Glykoprotein und ein Mitglied der Familie der Tyrosin-Proteinphosphatasen. Es ist auch als Leukozyten-common-Antigen (L-CA), Ly-5 und T200 bekannt.
• Das Protein unterliegt einem umfangreichen alternativen Spleißen, wodurch mehrere Isoformen mit Molekulargewichten von 130 kDa bis 144 kDa entstehen, wie von diesem Antikörper nachgewiesen.
• CD45 fungiert als positiver Regulator des T-Zell-Rezeptor (TCR)-Signalwegs durch Dephosphorylierung der hemmenden Tyrosinreste von Src-Familienkinasen wie LYN, wodurch die T-Zell-Aktivierung gefördert wird.
• Bei der T-Zell-Aktivierung rekrutiert und dephosphoryliert CD45 downstream-Effektoren einschließlich SKAP1 und FYN und moduliert so Signaltransduktionskaskaden.
• CD45 interagiert mit DPP4 und verstärkt die T-Zell-Koaktivierung sowie mit CLEC10A auf dendritischen Zellen, welches CD45, das Tn-Antigen trägt, auf Effektor-T-Zellen erkennt, um Aktivierungsschwellen zu regulieren und Autoreaktivität zu begrenzen.
• Subzellulär ist CD45 in der Zellmembran, Membran-Rafts und immunologischen Synapsen lokalisiert und positioniert es an Schlüsselstellen für die Einleitung von Immunsignalen.
• Das Protein ist stark glykosyliert und phosphoryliert, Modifikationen, die für seine strukturelle Integrität und enzymatische Aktivität wesentlich sind.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen deckt die Aminosäuren 26–566 von Maus-CD45 (extrazelluläre Domäne) ab, was darauf hindeutet, dass das/die Epitop(e) in der für die Durchflusszytometrie an lebenden Zellen zugänglichen extrazellulären Region liegen.
• Für die Durchflusszytometrie sollten Sie eine Titerung des Antikörpers in Betracht ziehen, um den Färbeindex zu optimieren und den Hintergrund zu reduzieren. Verwenden Sie geeignete Isotyp-Kontrollen und Viabilitätsfarbstoffe.
• Da CD45 auf allen Leukozyten exprimiert wird, stellen Sie sicher, dass geeignete Gating-Strategien angewendet werden, um die Zellpopulationen von Interesse zu identifizieren.
• Validieren Sie die Antikörperleistung in Ihrem spezifischen Probentyp (z. B. Milz, Lymphknoten, Blut), da die Antigendichte variieren kann.
• Vermeiden Sie wiederholte Gefrier- und Auftauzyklen; lagern Sie wie empfohlen.

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