PE/Cyanine7-Kaninchen-anti-Maus-CD8a-monoklonaler Antikörper für FC – P01731

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD8a

• CD8a (T-Zell-Oberflächen-Glykoprotein CD8-Alpha-Kette), auch als Lyt-2 bekannt, ist ein integrales Membran-Glykoprotein, das für die adaptive Immunität essenziell ist.
• Es fungiert als Korezeptor für MHC-Klasse-I-Moleküle auf antigenpräsentierenden Zellen und ermöglicht CD8+-T-Zellen, Peptid-MHC-I-Komplexe zu erkennen und zytotoxische Reaktionen gegen infizierte oder Tumorzellen einzuleiten.
• Nach der TCR-Bindung rekrutiert CD8a die Src-Kinase LCK zum TCR-CD3-Komplex und löst Phosphorylierungskaskaden aus, die zur Produktion von Lymphokinen, Adhäsion und Aktivierung von CTLs führen.
• In NK-Zellen unterstützen CD8a-Homodimere das Überleben und die serielle Abtötung von Zielzellen, indem sie die Konjugation und Lyse erleichtern.
• Die CD8a-Signalübertragung fördert die Differenzierung aktivierter Lymphozyten zu CD8+-Gedächtnis-T-Zellen und erhält dadurch eine langfristige Immunität aufrecht.
• Das Protein ist ausschließlich in der Zellmembran als Typ-I-Einfachtransmembranprotein lokalisiert und weist eine extrazelluläre Immunglobulindomäne, eine Transmembranhelix und einen kurzen zytoplasmatischen Schwanz auf.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören die Bildung von Disulfidbrücken, die N-Glykosylierung und die Palmitoylierung, die möglicherweise die Membranorganisation und Signalübertragung beeinflussen.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, wobei die Volllängen-Isoform in T-Zellen vorherrscht.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (Aminosäuren 28–196) von Maus-CD8a und vermeidet die Transmembran- und zytoplasmatischen Regionen; dieses Design soll Antikörper hervorbringen, die die native Zelloberflächenkonformation erkennen.
• Dieses PE/Cyanine7-Konjugat ist für die Durchflusszytometrie validiert; stellen Sie eine geeignete Titration sicher (z. B. 0,25–1 µg pro 10^6 Zellen) und schließen Sie bei der Analyse von Mauslymphozyten Isotypkontrollen ein.
• Da CD8a zusammen mit dem TCR exprimiert wird, sollte eine Ko-Färbung mit Anti-CD3 in Betracht gezogen werden, um CD8+-T-Zellen von NK-Zellen zu unterscheiden, die ebenfalls CD8a-Homodimere exprimieren können.
• Validieren Sie die Spezifität in CD8a-defizienten Mausstämmen oder durch Blockierung mit unkonjugiertem Anti-CD8a, um die Bindung zu bestätigen.
• Vermeiden Sie eine längere Lichtexposition, um die Stabilität des Fluorophors zu erhalten; verwenden Sie das Produkt bei Verdünnung innerhalb von 24 Stunden nach der Rekonstitution.

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