PE/Cyanine7-Kaninchen-anti-Maus-CD48-monoklonaler Antikörper (Durchflusszytometrie) – P18181

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD48

• CD48 (auch bekannt als BCM1, BLAST-1, SLAMF2, sgp-60) ist ein Glykosylphosphatidylinositol-(GPI)-verankertes Zelloberflächen-Glykoprotein, das zur Familie der Signaling-Lymphocytic-Activation-Molecule-(SLAM)-Proteine gehört.
• Es vermittelt die Aktivierung und Regulation von Immunzellen, indem es über seine N-terminale Immunglobulindomäne mit Zelloberflächenrezeptoren wie 2B4/CD244 und CD2 interagiert. Zugehörige Referenzen: PMID:21278219, PMID:9881969
• In T-Zellen assoziiert CD48 mit CD2, um die Src-Kinase LCK und das Adapterprotein LAT zum TCR/CD3-Komplex zu rekrutieren, wodurch die Phosphorylierung von LCK und die nachgeschaltete Signalübertragung verstärkt werden. Zugehörige Referenz: PMID:9881969
• Die Bindung von CD244 durch CD48 induziert die Phosphorylierung von ITSMs in CD244, was zur Bildung immunologischer Synapsen und zur gerichteten Sekretion lytischer Granula (Perforin, Granzymen) durch zytotoxische T-Lymphozyten und NK-Zellen führt. Zugehörige Referenzen: PMID:21278219, PMID:9881969
• Auf subzellulärer Ebene befindet sich CD48 auf der Zellmembran, ist in Membranrafts angereichert und kann auch in löslicher Form sezerniert werden.
• Zu den UniProt-Schlüsselwörtern gehören GPI-Anker, Immunglobulindomäne, Disulfidbindung, Glykoprotein und Lipoprotein, was seine strukturellen Merkmale und Membranassoziation widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen (Aminosäuren 23–216 des Maus-CD48) entspricht der vorhergesagten extrazellulären Domäne, sodass der Antikörper wahrscheinlich das native Oberflächenantigen erkennt. Für die Durchflusszytometrie sollte der Antikörper titriert werden, um die optimale Färbekonzentration unter Verwendung einer geeigneten Zelllinie oder von Primärzellen (z. B. Maus-Splenocyten oder Thymocyten) zu bestimmen.
• Da CD48 ein GPI-verankertes Protein ist, wird die Oberflächenfärbung von lebenden Zellen typischerweise ohne Permeabilisierung durchgeführt. Geeignete Isotypkontrollen und Fluoreszenz-minus-eins-(FMO)-Kontrollen sollten eingeschlossen werden, um die Spezifität zu bestätigen.
• PE/Cyanine7 ist ein Tandemfarbstoff. Schützen Sie ihn vor längerer Lichteinwirkung, um ein Ausbleichen zu verhindern. Eine Fixierung kann die Fluoreszenz des Tandemfarbstoffs verändern. Daher sollte die Kompatibilität überprüft werden, wenn eine intrazelluläre Färbung erforderlich ist.
• CD48 wird auf allen hämatopoetischen Zellen mit Ausnahme von Erythrozyten exprimiert. Verwenden Sie bekannte positive (z. B. EL4, YAC-1) und negative Kontrollen, um die Färbemuster zu validieren.

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