PE/Cyanine7 Kaninchen anti-Maus CD25 monoklonaler Antikörper für FC - P01590

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD25-Funktion und -Lokalisierung

• CD25 ist die Alpha-Untereinheit des Interleukin-2-Rezeptors, auch als p55 oder IL-2RA bezeichnet.
• Sie fungiert als Hochaffinitätsrezeptor für IL-2 und spielt eine kritische Rolle bei der Immunhomöostase.
• CD25 ist ein Schlüsselregulator der Immuntoleranz durch Kontrolle der Aktivität regulatorischer T-Zellen (TREGs), die die Aktivierung und Expansion autoreaktiver T-Zellen unterdrücken.
• Das Protein ist ein Typ-I-Transmembran-Glykoprotein, das auf der Zellmembran lokalisiert ist, mit einer extrazellulären Region, die mehrere Sushi-(CCP)-Domänen enthält.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung und Disulfidbrückenbildung, die für seine Struktur und Funktion unerlässlich sind.
• Die CD25-Expression wird nach T-Zell-Aktivierung hochreguliert und dient als klassischer Marker für die Treg-Identifizierung in Mausmodellen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das PE/Cyanine7-Direktkonjugat ermöglicht eine Einstufen-Färbung, minimiert die Handhabungszeit und reduziert den Bedarf an Sekundärreagenzien in der Durchflusszytometrie.
• Optimieren Sie die Arbeitskonzentration des Antikörpers durch Titrierung im entsprechenden Mauszellsystem, um den besten Färbeindex zu erzielen.
• Verwenden Sie geeignete Isotyp-Kontrollen und Fluoreszenz-minus-eins (FMO)-Kontrollen, um eine spezifische Signalerkennung zu gewährleisten.
• Da das Immunogen die extrazelluläre Domäne (aa 22-236) abdeckt, eignet sich dieser Antikörper gut für die Oberflächenfärbung lebender Zellen; wenn eine intrazelluläre Detektion erforderlich ist, validieren Sie die Fixierungs-/Permeabilisierungsprotokolle mit diesem Klon.
• Für die Treg-Identifizierung kann eine Co-Färbung mit FoxP3 oder anderen Markern nach der Oberflächenfärbung durchgeführt werden, überprüfen Sie jedoch die Verträglichkeit der Fixierungspuffer mit dem PE/Cyanine7-Fluorophor.

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