PE/Cyanine7-Kaninchen-anti-humaner-CD8b-monoklonaler Antikörper für FC – P10966

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation der CD8-Beta-Kette

• CD8B codiert die Beta-Kette des CD8-Glykoproteins, eines T-Zell-Oberflächenrezeptors, der aufgrund von alternativem Spleißen in mehreren Isoformen (Isoformen 1, 3, 5, 6, 7, 8) vorkommt. Isoform 1 wird überwiegend im Thymus exprimiert, während Isoform 6 in peripheren CD8+-T-Zellen häufiger vorkommt.
• Das Protein fungiert als Korezeptor für MHC-Klasse-I-Moleküle auf antigenpräsentierenden Zellen und bindet gleichzeitig mit dem T-Zell-Rezeptor (TCR), um die T-Zell-Aktivierung zu verstärken.
• Der zytoplasmatische Schwanz enthält eine Palmitoylierungsstelle, die CD8 zu Lipid-Rafts dirigiert und dadurch eine effiziente Signalübertragung ermöglicht.
• Nach der Bindung an MHC I rekrutiert CD8B die Src-Kinase LCK zum TCR-CD3-Komplex und initiiert Phosphorylierungskaskaden, die zur Produktion von Lymphokinen, Motilität, Adhäsion und Aktivierung zytotoxischer T-Lymphozyten (CTL) führen.
• Spielt eine entscheidende Rolle bei der thymischen Selektion von CD8+-T-Zellen während der Entwicklung.
• Das Protein ist ein Transmembran-Glykoprotein mit Disulfidbindungen und gehört zur Immunglobulin-Superfamilie.
• Es ist hauptsächlich in der Zellmembran lokalisiert, es existieren jedoch auch sezernierte Isoformen.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (AS 22–170) des humanen CD8b. Daher erkennt der Antikörper wahrscheinlich die native Konformation auf lebenden Zellen und eignet sich somit für die Durchflusszytometrie.
• Für FC sollte der Antikörper titriert werden, um die optimale Färbekonzentration für den jeweiligen Zelltyp zu bestimmen. Verwenden Sie geeignete Kontrollen (Isotypkontrolle, ungefärbte Zellen), um die Spezifität zu beurteilen.
• Schützen Sie das PE/Cyanine7-Konjugat vor Licht, um die Fluoreszenzstabilität zu erhalten.
• Erwägen Sie bei Bedarf eine Fixierung der Zellen nach der Färbung; beachten Sie jedoch, dass die Fixierung die Zugänglichkeit des Epitops beeinflussen kann.
• Validieren Sie die Kreuzreaktivität in humanen Proben. Bei anderen Spezies sollte die Sequenzhomologie zuvor bestätigt werden.

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