PE/Cyanine7 Kaninchen anti-Human CD33 monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P20138

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD33-Funktion und -Lokalisierung

• CD33 (Siglec-3) ist ein Sialinsäure-bindendes, immunoglobulin-ähnliches Lektin, das Zell-Zell-Interaktionen vermittelt und hilft, Immunzellen in einem Ruhezustand zu halten. Verwandte Referenzen: PMID:10611343, PMID:11320212, PMID:15597323
• Es bindet bevorzugt alpha-2,3- und alpha-2,6-verknüpfte Sialinsäure-tragende Glykane auf Glykoproteinen und Glykolipiden. Verwandte Referenzen: PMID:7718872
• Bei Ligandenbindung (z. B. C1q oder sialylierte Glykoproteine) werden seine zytoplasmatischen ITIM-Motive durch Src-ähnliche Kinasen wie LCK phosphoryliert, wodurch Andockstellen für die Phosphatasen PTPN6/SHP-1 und PTPN11/SHP-2 geschaffen werden. Verwandte Referenzen: PMID:10887109, PMID:28325905, PMID:10206955, PMID:10556798
• Diese Phosphatasen dephosphorylieren downstream-Signalmoleküle, was zu hemmenden Effekten führt; ein unterdrückender Weg in Monozyten erfordert PI3K. Verwandte Referenzen: PMID:10206955, PMID:10887109, PMID:15597323
• CD33 lokalisiert an der Zellmembran und in Peroxisomen und wird hauptsächlich auf monozytären/myeloischen Linienzellen und Hirnmikroglia exprimiert (alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen).
• Das Protein ist ein Single-Pass-Typ-I-Membranglykoprotein mit einer extrazellulären Ig-ähnlichen V-Typ-Domäne, mehreren intrazellulären ITIM-Motiven und wird durch Disulfidbrücken und Phosphorylierung modifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen deckt die Aminosäuren 18–259 ab, was die extrazelluläre Sialinsäure-Bindedomäne einschließt, sodass der Antikörper natives CD33 auf der Zelloberfläche erkennt – ideal für die Durchflusszytometrie (FC).
• Für eine optimale FC-Färbung titrieren Sie den Antikörper im relevanten humanen myeloischen/monozytären Zellsystem, um die geeignete Arbeitsverdünnung zu ermitteln.
• Verwenden Sie geeignete Isotyp-Kontrollen und Vitalitätsfarbstoffe in Ihrem FC-Panel und schützen Sie den PE/Cyanine7-konjugierten Antikörper vor Licht, da das Fluorophor lichtempfindlich ist.

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