PE/Cyanine7-Kaninchen-anti-humaner-AXL-monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie – P30530

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: AXL-Funktion und -Lokalisation

• AXL (auch bekannt als UFO, ARK, JTK11, Tyro7) ist eine Rezeptor-Tyrosinkinase und ein Protoonkogen, das vom AXL-Gen kodiert wird und zur TAM-Familie (Tyro3, AXL, Mer) gehört.
• Fungiert als Rezeptor für das wachstumsarrest-spezifische Protein 6 (GAS6); die Ligandenbindung induziert die Rezeptordimerisierung, Autophosphorylierung und Aktivierung mehrerer nachgeschalteter Signalwege, darunter PI3K/AKT, GRB2, PLCG1, LCK und PTPN11, und reguliert dadurch Zellüberleben, Proliferation, Migration und Differenzierung.
• Die GAS6/AXL-Signalübertragung ist am Überleben von Endothelzellen unter Ansäuerung, an der Entwicklung natürlicher Killerzellen, der Leberregeneration, der Migration von GnRH-Neuronen, der Thrombozytenaktivierung und der negativen Regulation der durch Toll-like-Rezeptoren (TLR) vermittelten angeborenen Immunantwort beteiligt.
• Ist überwiegend als Typ-I-Transmembranprotein mit nur einer Transmembrandomäne in der Zellmembran lokalisiert.
• Wird in metastasierten Kolontumoren stark exprimiert, mit geringerer Expression in primären Kolontumoren und sehr schwacher Expression in normalem Kolongewebe.
• Fungiert als Rezeptor für den Eintritt mehrerer Viren in Wirtszellen: Lassa-Virus, lymphozytäres Choriomeningitis-Virus und Ebolavirus, wahrscheinlich durch GAS6-abhängige Erkennung von Phosphatidylserin auf viralen Hüllen. Fördert außerdem den Eintritt des Zika-Virus in Gliazellen, Sertoli-Zellen und Astrozyten; das Zika-Virus verstärkt die AXL-Kinaseaktivität, um die Typ-I-Interferon-Signalübertragung über einen SOCS1-abhängigen Mechanismus zu unterdrücken. Verwandte Referenzen: PMID:28076778 PMID:29379210 PMID:31311882
• Das Protein weist ein vorhergesagtes Molekulargewicht von etwa 98 kDa (UniProt: 98.337 Da) auf und enthält zwei immunoglobulinähnliche Domänen, eine Transmembranregion und eine Tyrosinkinasedomäne. Zu den wesentlichen Schlüsselbegriffen gehören ATP-Bindung, Glykoprotein, Onkogen, Phosphoprotein und Wirts-Virus-Interaktion.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Bei der Durchflusszytometrie sollte der Antikörper titriert werden, um die optimale Arbeitskonzentration für den jeweiligen Probentyp zu bestimmen.
• Den Antikörper vor längerer Lichteinwirkung schützen, um ein Ausbleichen des PE/Cyanine7-Fluorophors zu verhindern.
• Die Leistung in geeigneten humanen, AXL-exprimierenden Zellmodellen (z. B. metastasierten Kolonkarzinom-Zelllinien) validieren und geeignete Positiv- und Negativkontrollen einbeziehen.
• Einen mit demselben Fluorophor konjugierten Isotyp-Kontrollantikörper derselben Wirtsspezies verwenden, um Schwellenwerte für das Gating festzulegen.
• Die AXL-Expression kann durch zelluläre Stimulation oder den Krankheitszustand moduliert werden; daher sollte die Zielproteinexpression im experimentellen System vor der Färbung überprüft werden.

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