PE/Cyanine7 Anti-Maus Ly-6A/E (Sca-1) monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P05533

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation des Lymphozytenantigens 6A-2/6E-1 (Sca-1)

• Das Lymphozytenantigen 6A-2/6E-1, allgemein bekannt als Stammzellantigen 1 (Sca-1) oder T-Zell-aktivierendes Protein (TAP), wird bei Mäusen durch das Gen Ly6a kodiert und gehört zur Ly-6/uPAR-Superfamilie glykosylphosphatidylinositol (GPI)-verankerter Proteine.
• Sca-1 ist ein etablierter Marker für hämatopoetische Stammzellen und Vorläuferzellen der Maus und wird in vielen Geweben breit exprimiert.
• Die Hauptfunktion von Sca-1 ist mit der T-Zell-Aktivierung verbunden: Es kann die Signalübertragung nach Bindung modulieren und trägt zur Regulation der Immunantwort bei.
• Sca-1 ist über einen GPI-Rest an die äußere Schicht der Plasmamembran verankert, besitzt keine transmembranare oder zytoplasmatische Domäne und ist für die Signalübertragung auf die Assoziation mit Lipid Rafts angewiesen.
• Als GPI-verankertes Glykoprotein durchläuft Sca-1 posttranslationale Modifikationen einschließlich N-gekoppelter Glykosylierung und der Anfügung des GPI-Ankers, die für seine Membranlokalisation und Funktion entscheidend sind.
• Das Protein enthält konservierte Disulfidbindungen, die seine für die Ly-6-Familie charakteristische Dreifingerfaltung stabilisieren und Protein-Protein-Interaktionen erleichtern.
• Die beobachtete Molekularmasse von Sca-1 übersteigt aufgrund der umfangreichen Glykosylierung oft ihre berechnete Masse (14,4 kDa); bei der SDS-PAGE unter reduzierenden Bedingungen wird sie typischerweise bei etwa 115 kDa nachgewiesen.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde unter Verwendung eines rekombinanten Immunogens hergestellt, das die extrazelluläre Domäne (Aminosäuren 27-111) von Maus Sca-1 umfasst. Er zielt auf die native Konformation ab, um eine überlegene Erkennung in der Durchflusszytometrie zu gewährleisten.
• Für Anwendungen in der Durchflusszytometrie empfehlen wir, den Antikörper zu titrieren, um die optimale Arbeitskonzentration zu bestimmen, und geeignete Isotypkontrollen sowie Schritte zur Blockierung von Fc-Rezeptoren einzuschließen, um unspezifische Bindung zu minimieren.
• Beachten Sie, dass das PE/Cyanine7-Konjugat empfindlich gegenüber Licht und Gefrier-Auftau-Zyklen ist; schützen Sie es stets vor Licht und vermeiden Sie wiederholtes Einfrieren.
• Validieren Sie die Antikörperspezifität in der relevanten Mausstamm oder Zelllinie, da allelische Variationen (z. B. Ly-6A.2 vs Ly-6E.1) existieren; das Immunogen entspricht dem Ly-6A.2-Allel.
• Die Expression von Sca-1 kann bei Aktivierung von T-Zellen hochreguliert werden; daher können Zeitverlaufsexperimente erforderlich sein, um dynamische Expressionsänderungen zu erfassen.

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