PE/Cyanine5 Kaninchen Anti-Maus CD45 monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie - P06800

Kernspezifikationen und Parameter des Produkts

Biologischer Hintergrund: CD45-Funktion und Lokalisation

• CD45, auch bekannt als Leukozyten-Common-Antigen (L-CA), Lymphozytenantigen 5 (Ly-5) und T200, ist eine Rezeptor-Typ-Tyrosin-Protein-Phosphatase C, die vom Ptprc-Gen kodiert wird. Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen, darunter CD45R und B220, mit Molekulargewichten zwischen 130 und 144 kDa.
• Es fungiert als kritischer Regulator der T-Zell-Aktivierung über den Antigenrezeptor und wirkt bei Bindung an DPP4 als positiver Koaktivator. Die erste seiner zwei intrazellulären Phosphatasedomänen besitzt enzymatische Aktivität, während die zweite die Substratspezifität moduliert.
• CD45 dephosphoryliert wichtige Signalmoleküle wie SKAP1, FYN und LYN, um deren Aktivität zu modulieren. Es interagiert zudem mit CLEC10A auf dendritischen Zellen und verknüpft die Glykosylierungserkennung mit den Schwellenwerten für die T-Zell-Aktivierung.
• Das Protein lokalisiert sich in der Zellmembran, in Membran-Rafts und in der immunologischen Synapse, was es zu einem zentralen Vermittler der Signalübertragung an den Kontaktstellen zwischen T-Zellen und antigenpräsentierenden Zellen macht.
• CD45 ist stark durch Glykosylierung und Phosphorylierung modifiziert, wie seine UniProt-Schlüsselwörter (Glykoprotein, Phosphoprotein) widerspiegeln. Es durchspannt die Membran über eine einzelne Transmembranhelix.
• CD45 wird vorwiegend auf allen Leukozyten exprimiert (daher "Common Antigen") und ist essenziell für die Entwicklung und Funktion von Lymphozyten. Sein Molekulargewicht beträgt etwa 145 kDa, wobei die Isoformen aufgrund des Spleißens der extrazellulären Domäne variieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für die Durchflusszytometrie empfiehlt es sich, den Antikörper zu titrieren, um die optimale Konzentration für Ihre Zellpopulation und Färbebedingungen zu bestimmen.
• Verwenden Sie bei der Erstellung von Mehrfarben-Panels geeignete Isotyp-Kontrollen und Kompensationskontrollen.
• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (Aminosäuren 26–566), was darauf hindeutet, dass der Antikörper wahrscheinlich Oberflächenepitope erkennt; ein Vorblocken mit Fc-Rezeptor-Blockern kann unspezifische Bindungen reduzieren.
• Validieren Sie die Leistung in der relevanten Maus-Leukozyten-Subpopulation, da die Expressionsniveaus zwischen verschiedenen Lymphozytenpopulationen variieren können.

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