PE/Cyanine5 Maus anti-Mensch CD3 monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P07766

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD3 Epsilon

• CD3E kodiert die CD3-Epsilon-Kette, eine Kernuntereinheit des T-Zellrezeptor (TCR)-CD3-Komplexes, die für die adaptive Immunität essenziell ist, indem sie Aktivierungssignale nach der Antigenerkennung überträgt. Zugehörige Referenzen: PMID:15294938 PMID:15546002 PMID:2470098
• Intrazelluläre immunorezeptor-tyrosinbasierte Aktivierungsmotive (ITAMs) in CD3E werden nach der TCR-Bindung durch die Kinasen LCK und FYN phosphoryliert, wodurch Bindungsstellen für ZAP70 entstehen und nachgeschaltete Signalkaskaden initiiert werden. Zugehörige Referenzen: PMID:2470098 PMID:40592325
• CD3E trägt zur korrekten T-Zellentwicklung und Thymozytenselektion bei und gewährleistet die Bildung eines funktionierenden Immunrepertoires.
• Die zytoplasmatische Domäne von CD3E enthält Endozytose-Motive, die die Internalisierung und Herunterregulation von TCR-CD3 vermitteln und die T-Zell-Reaktivität nach Stimulation modulieren. Zugehörige Referenzen: PMID:10384095 PMID:26507128
• Als Rezeptor für ITPRIPL1 kann CD3E die T-Zellaktivierung hemmen, indem es NCK1 rekrutiert, was die Bindung von ZAP70 verhindert und die ERK-NFkB-Signalübertragung sowie den Kalziumeinstrom blockiert. Zugehörige Referenzen: PMID:12110186 PMID:38614099
• CD3E ist ein einfassmembranständiges Protein vom Typ I mit einer extrazellulären immunglobulinähnlichen Domäne, einer Transmembranhelix und einem zytoplasmatischen Ende; es lokalisiert ausschließlich an der Plasmamembran.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen die ITAM-Phosphorylierung und eine konservierte Disulfidbindung, die die extrazelluläre Struktur stabilisiert.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Dieser Antikörper, der gegen rekombinantes menschliches CD3-Protein gewonnen wurde, ist für die Durchflusszytometrie validiert; für andere Anwendungen empfehlen wir Vorexperimente durchzuführen, um die Reaktivität in Ihrem Probensystem zu bestätigen.
• Beim Aufbau von Multifarben-Durchflusszytometrie-Panels verwenden Sie passende Kompensationskontrollen und titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Färbekonzentration zu bestimmen.
• Als Tandem-Farbstoffkonjugat ist PE/Cyanine5 licht- und fixiermittelempfindlich; minimieren Sie die Lichteinstrahlung, verwenden Sie eiskalte Färbungspuffer und vermeiden Sie langwierige Fixierung, um die Signalintensität zu erhalten.
• Für intrazelluläre Färbung oder den Phospho-CD3-Nachweis validieren Sie die Permeabilisierungsbedingungen, da harte Behandlungen die Epitopzugänglichkeit oder Farbstoffstabilität beeinträchtigen können.

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