PE-Ratten-Anti-Maus CD3 monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P04235 / P22646

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD3-Funktion und -Lokalisierung

• CD3 ist ein Mehrkettenkomplex, der aus Delta-, Epsilon-, Gamma- und Zeta-Ketten besteht; dieser Antikörper reagiert mit den CD3-Delta- und -Epsilon-Ketten (SWISS: P04235/P22646), die sich mit dem T-Zell-Rezeptor (TCR) zusammenschließen, um den TCR-CD3-Komplex auf T-Lymphozyten zu bilden.
• Der TCR-CD3-Komplex ist für die adaptive Immunität essentiell und überträgt Signale von antigenpräsentierenden Zellen nach TCR-Engagement über immunorezeptor-tyrosinbasierte Aktivierungsmotive (ITAMs) in den zytoplasmatischen Domänen der CD3-Ketten.
• CD3-Delta (P04235) spielt eine kritische Rolle bei der Thymozytendifferenzierung; bei Fehlen eines funktionsfähigen TCR-CD3-Komplexes differenzieren sich Thymozyten nicht ordnungsgemäß, was seine Bedeutung für die T-Zell-Entwicklung unterstreicht. Verwandte Referenzen: PMID:10935641
• CD3-Ketten interagieren mit den CD4- und CD8-Korezeptoren und stellen eine funktionelle Verbindung her, die für die Aktivierung und positive Selektion von CD4+- oder CD8+-T-Zellen erforderlich ist.
• Die subzelluläre Lokalisierung ist auf die Zellmembran beschränkt, wo CD3 als integraler Membranrezeptorkomplex fungiert.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen die Phosphorylierung von ITAMs durch die Src-Familienkinasen LCK und FYN sowie Glykosylierung und Disulfidbrückenbildung, die für die Signaltransduktion und strukturelle Integrität entscheidend sind.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper wird als PE-Konjugat geliefert, was eine direkte Einstufenfärbung für die Durchflusszytometrie ermöglicht; Titrationsexperimente werden empfohlen, um die optimale Konzentration für Ihren spezifischen Probentyp zu bestimmen.
• Validieren Sie den Antikörper in Maus-Lymphozytenpopulationen (z. B. Milzzellen, Thymozyten) und verwenden Sie geeignete Isotypkontrollen, um die Spezifität zu bestätigen.
• Da das Immunogen ein synthetisches Peptid ist, das von Maus-CD3 abgeleitet ist, kann das Epitop linear und robust sein; dennoch sollten fixierbare Lebensfähigkeitsfarbstoffe oder andere Fluorophorkombinationen für Multicolor-Panels getestet werden.
• Berücksichtigen Sie Protokolle zur Oberflächenfärbung und vermeiden Sie eine Permeabilisierung, sofern das Epitop erhalten bleibt, da Fixierung/Permeabilisierung einige Epitope beeinträchtigen kann.

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