PE-Kaninchen-anti-Ratte-IFN-gamma monoklonaler Antikörper für intrazelluläre Durchflusszytometrie - P01581

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: IFN-gamma-Funktion und -Lokalisierung

• Interferon-gamma (IFN-gamma) ist ein Typ-II-Interferon-Zytokin, das hauptsächlich von aktivierten T-Lymphozyten und natürlichen Killerzellen (NK-Zellen) produziert wird und als zentraler Vermittler der angeborenen und adaptiven Immunität wirkt.
• Es entfaltet antimikrobielle, antivirale und antitumorale Aktivitäten durch die Aktivierung effektorischer Immunzellen und die Verstärkung der Antigenpräsentation über sowohl MHC-Klasse-I- als auch -Klasse-II-Wege.
• Signalisiert über den JAK-STAT-Weg: Nach Bindung an seinen Rezeptor IFNGR1 induziert es die Aktivierung von JAK2, JAK1 und STAT1, was zur nukleären Translokation von STAT1 und der Transkription interferonregulierter Gene wie IRF1 führt.
• Reguliert die MHC-Klasse-I-Antigenprozessierung hoch, indem es den Ersatz konstitutiver Proteasom-Untereinheiten durch Immunoproteasom-Untereinheiten und die Induktion des PA28-Aktivators bewirkt, wodurch die Peptidgeneration und das Repertoire für die MHC-Beladung verbessert werden.
• Fördert die MHC-Klasse-II-Expression durch Hochregulierung von Schlüsselmolekülen wie Cathepsinen B, H und L (nach Ähnlichkeit).
• Beteiligt sich an der Regulation hämatopoetischer Stammzellen, beeinflusst Entwicklung, Ruhezustand und Differenzierung (nach Ähnlichkeit).
• Das Protein wird sezerniert und enthält charakteristische strukturelle Merkmale, einschließlich eines Signalpeptids, Glykosylierungsstellen und einer Pyrrolidoncarbonsäure-Modifikation.
• Das reife Ratten-IFN-gamma-Protein hat ein vorhergesagtes Molekulargewicht von ~18 kDa (17918 Da), was mit dem Immunogen-Design übereinstimmt.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Der Antikörper ist für intrazelluläre Durchflusszytometrie (FC intra) konzipiert. Stellen Sie sicher, dass geeignete Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle verwendet werden, um die PE-Fluoreszenz und die Antigenzugänglichkeit aufrechtzuerhalten.
• Da das Immunogen die reife Peptidregion (aa 20-156) abdeckt, erkennt der Antikörper wahrscheinlich die sezernierte, prozessierte Form von Ratten-IFN-gamma.
• Führen Sie Titrationsexperimente durch, um die optimale Arbeitskonzentration für Ihren spezifischen Zelltyp und Ihre Stimulationsbedingungen zu bestimmen.
• Valideren Sie die Antikörperleistung mit relevanten Positivkontrollen, wie z.B. PMA/Ionomycin-stimulierten Rattenmilzzellen oder aktivierten T-Zelllinien, und schließen Sie Isotypkontrollen ein.
• Schützen Sie PE-konjugierte Proben vor Licht, um ein Ausbleichen zu verhindern, und verwenden Sie geeignete Kompensationseinstellungen bei Kombination mit anderen Fluorophoren.

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