PE Kaninchen-anti-Ratte-CD8a-monoklonaler Antikörper für FC - P07725

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD8a

• CD8a ist die Alpha-Kette des T-Zell-Oberflächenglykoproteins CD8, auch bekannt als OX-8-Membranantigen oder CD8-Antigen-32-kDa-Kette. Es ist für die adaptive Immunität essenziell und dient als Korezeptor für MHC-Klasse-I-Moleküle auf antigenpräsentierenden Zellen.
• Der CD8-Korezeptor bindet an die relativ konstante Alpha-3-Domäne von MHC-Klasse I, während der T-Zell-Rezeptor (TCR) mit den peptidpräsentierenden Alpha-1- und Alpha-2-Domänen interagiert. Dadurch wird die Erkennung von aus zytosolischen Antigenen stammenden Peptiden durch T-Zellen ermöglicht.
• Bei gleichzeitiger Bindung an den TCR-CD3-Komplex rekrutiert CD8a die Src-Kinase LCK an die zytoplasmatische Domäne und initiiert Signalkaskaden, die die Produktion von Lymphokinen, die T-Zell-Adhäsion und -Motilität sowie die zytotoxische Aktivierung gegen infizierte oder transformierte Zellen fördern.
• Auf natürlichen Killerzellen (NK-Zellen) exprimierte CD8a-Homodimere stellen einen Überlebensmechanismus bereit, der die Konjugation mit mehreren Zielzellen und deren sukzessive Lyse ermöglicht, und unterstützen gleichzeitig die Differenzierung und Aufrechterhaltung von CD8+-Gedächtnis-T-Zellen.
• Die subzelluläre Lokalisation befindet sich überwiegend an der Zellmembran. CD8a liegt dort als einzelmembraniges Transmembran-Glykoprotein vor, dessen extrazellulärer Bereich eine immunoglobulinähnliche Domäne enthält.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören die N-glykosylierung und die Palmitoylierung an einem zytoplasmatischen Cystein, die möglicherweise die Assoziation mit Membran-Rafts und die Signalübertragung beeinflussen.
• Gewebespezifität: hauptsächlich exprimiert auf zytotoxischen T-Lymphozyten, NK-Zellen und Untergruppen dendritischer Zellen, mit einem Molekulargewicht von etwa 32 kDa in der glykosylierten Form gegenüber 26 kDa für das unmodifizierte Polypeptid.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen besteht aus einem rekombinanten Fusionsprotein, das die Aminosäuren 26-189 der extrazellulären Domäne von Ratten-CD8a umfasst. Es wird vorausgesagt, dass dadurch Antikörper erzeugt werden, die das native, auf der Zelloberfläche exponierte Epitop auf lebenden Zellen erkennen.
• Dieser PE-konjugierte monoklonale Kaninchenantikörper ist für den direkten durchflusszytometrischen Nachweis von CD8a-positiven Zellen in Rattenproben vorgesehen. Es wird empfohlen, den Antikörper zu titrieren, um die optimale Verdünnung für den jeweiligen Probentyp und das Hintergrundsignal zu bestimmen.
• Bei mehrfarbigen Durchflusszytometrie-Panels ist sicherzustellen, dass geeignete Einzelstainings- und Fluoreszenz-minus-eins-Kontrollen (FMO-Kontrollen) enthalten sind, um CD8a+-Populationen ohne Artefakte durch spektrale Überlappung korrekt zu gaten.
• Da eine Kreuzreaktivität ausschließlich für Ratten angegeben ist, sollte die Reaktivität mit anderen Spezies bei Bedarf validiert werden. Für eine breitere Reaktivität können alternative Klone oder Wirtsspezies erforderlich sein.
• Für Immunhistochemie oder andere nicht aufgeführte Anwendungen wird eine experimentelle Validierung empfohlen, da der Antikörper ausschließlich für FC qualifiziert ist.

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