PE Kaninchen anti-Maus S100A9 Monoklonaler Antikörper für intrazelluläre Durchflusszytometrie - P31725

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von S100A9

• S100A9 ist ein Calcium- und Zink-bindendes Protein, das eine zentrale Rolle bei der Regulation von Entzündungsprozessen und der Immunantwort spielt, einschließlich Neutrophilen-Chemotaxis, Phagozytose und Degranulierung.
  Zugehörige Referenzen: PMID:15331440, PMID:17767165, PMID:18403730
• Intrazellulär fördert S100A9 den Transport und den Stoffwechsel von Arachidonsäure in Leukozyten, moduliert das Tubulin-abhängige Zytoskelett während der Phagozytenwanderung und aktiviert die neutrophile NADPH-Oxidase.
  Zugehörige Referenzen: PMID:15331440
• Extrazellulär übt S100A9 proentzündliche, antimikrobielle, oxidanzfangende und apoptoseinduzierende Aktivitäten aus.
  Zugehörige Referenzen: PMID:21382888
• S100A9 wirkt als Alarmin oder damage-associated molecular pattern (DAMP) und stimuliert angeborene Immunzellen durch Bindung an Toll-like Rezeptor 4 (TLR4) und den Rezeptor für fortgeschrittene Glykierungsendprodukte (AGER).
  Zugehörige Referenzen: PMID:17767165, PMID:18403730, PMID:19402754
• Die Bindung an TLR4 und AGER aktiviert die MAP-Kinase- und NF-kappa-B-Signalwege und verstärkt die proentzündliche Kaskade.
  Zugehörige Referenzen: PMID:17767165, PMID:18403730, PMID:19402754
• Liegt hauptsächlich als Calprotectin-Heterodimer (S100A8/S100A9) vor, das intrazelluläre und extrazelluläre Immunfunktionen vereint.
• Zeigt antimikrobielle Aktivität gegen Bakterien und Pilze, wahrscheinlich durch Chelatisierung von Zn²⁺, das für das mikrobielle Wachstum essenziell ist.
• S100A9 wird überwiegend sezerniert, kann aber auch im Zytoplasma, assoziiert mit dem Zytoskelett und auf der Zellmembran gefunden werden.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Protein, das die gesamte Länge von Maus S100a9 (Reste 1–113) abdeckt; daher wird erwartet, dass der Antikörper natives S100A9 in der intrazellulären Durchflusszytometrie erkennt. Für eine optimale Färbung führen Sie eine für Kern-/Zytoplasmaproteine geeignete Fixierung und Permeabilisierung durch und titrieren Sie den PE-konjugierten Antikörper, um das optimale Signal-Rausch-Verhältnis zu bestimmen.
• S100A9 ist hoch exprimiert in Zellen der myeloischen Linie (Neutrophile, Monozyten, Makrophagen). Verwenden Sie relevante Positivkontrollen wie Mausknochenmark oder Milzzellen und schließen Sie Isotypkontrollen und Fc-Blockierung ein, um unspezifische Bindung zu minimieren.
• Bestätigen Sie bei der intrazellulären Durchflusszytometrie die Antikörperspezifität mit S100A9-Knockout-Zellen oder blockieren Sie mit dem rekombinanten Immunogen, falls verfügbar.
• Da es sich um einen PE-konjugierten primären Antikörper handelt, ermöglicht er einen direkten einstufigen Nachweis, reduziert den Hintergrund durch sekundäre Antikörper und vereinfacht Multicolor-Panels.

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