PE-Konjugierter Kaninchen-anti-Maus IL-9 monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie (intrazellulär) - P15247

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: IL-9-Funktion und -Lokalisierung

• Interleukin-9 (IL-9), auch bekannt als Zytokin P40 und T-Zell-Wachstumsfaktor P40, ist ein multifunktionales Zytokin, das durch das Il9-Gen in der Maus kodiert wird (UniProt P15247).
• IL-9 wird hauptsächlich von T-Helfer-2 (Th2)-Lymphozyten, Mastzellen und NKT-Zellen sezerniert und spielt eine entscheidende Rolle bei Immunantworten gegen Parasiten sowie bei allergischen Entzündungen. Verwandte Referenzen: PMID:11070175, PMID:19433802
• Es moduliert die intestinale Epithelpermeabilität und trägt zur adaptiven Immunität bei, insbesondere in mukosalen Geweben. Verwandte Referenzen: PMID:12704113
• IL-9 fördert die Differenzierung von IL-17-produzierenden Helfer-T-Zellen (TH17) und stimuliert die Proliferation und Differenzierung von Mastzellen, was es mit entzündlichen und allergischen Signalwegen verbindet. Verwandte Referenzen: PMID:11070175, PMID:19433802
• Mechanistisch signalisiert IL-9 über einen Rezeptor, der aus der IL-9R-Alpha-Kette und der gemeinsamen Gamma-Kette (IL2RG) besteht, was zur Aktivierung der JAK1- und JAK3-Kinasen und der nachgeschalteten STAT1-, STAT3- und STAT5-Transkriptionsfaktoren führt. STAT1 treibt hauptsächlich Differenzierungsgene an, während STAT3 und STAT5 anti-apoptotische Effekte vermitteln. Verwandte Referenzen: PMID:2145361, PMID:7718508, PMID:10464327
• Das reife IL-9-Protein ist ein sezerniertes Glykoprotein mit einem vorhergesagten Molekulargewicht von etwa 16 kDa (UniProt: 16075 Da) und enthält strukturelle Merkmale, die typisch für die Familie der Vier-Helix-Bündel-Zytokine sind.
• Die subzelluläre Lokalisierung ist extrazellulär nach der Signalpeptidspaltung; es fungiert als löslicher Mediator in der extrazellulären Umgebung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 19–114 von Maus IL-9 (NP_032399.1), was das reife sezernierte Protein ohne das Signalpeptid umfasst. Dieses Design führt wahrscheinlich zur Erzeugung von Antikörpern, die die native, prozessierte Form von IL-9 erkennen.
• Als PE-konjugierter monoklonaler Antikörper ist er für die intrazelluläre Durchflusszytometrie (FC intra) optimiert. Für den Nachweis von intrazellulärem IL-9 sollten Zellen vor der Färbung mit einem geeigneten Protokoll fixiert und permeabilisiert werden. Ein Stimulationsschritt (z. B. mit PMA/Ionomycin in Gegenwart eines Proteintransportinhibitors) kann erforderlich sein, um das Zytokin intrazellulär in bestimmten Zelltypen anzureichern.
• Da berichtet wird, dass der Antikörper mit Maus IL-9 reagiert, wurde die Kreuzreaktivität mit menschlichem oder anderen Spezies nicht bewertet; es wird empfohlen, die Spezifität im beabsichtigten Probensystem zu validieren.
• Der monoklonale Kaninchenursprung kann hohe Affinität und Spezifität bieten; dennoch ist eine Titration ratsam, um die optimale Konzentration für jede experimentelle Bedingung zu bestimmen.
• Beachten Sie, dass der Antikörper auf Eisbeuteln versandt wird; nach Erhalt wie empfohlen lagern (typischerweise bei 2–8°C im Dunkeln für konjugierte Antikörper), um die Stabilität zu erhalten.

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