PE Kaninchen-anti-Maus CD40 monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P27512

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD40

• CD40 ist ein Mitglied der Tumornekrosefaktor-Rezeptor-Superfamilie und fungiert als Rezeptor für CD40-Ligand (TNFSF5/CD40LG).
• Die Ligandenbindung löst intrazelluläre Signalkaskaden aus, an denen TRAF6 und MAP3K8 beteiligt sind, was zur ERK-Aktivierung führt (PubMed:12881420). Verwandte Referenzen: PMID:12881420
• Diese TRAF6/MAP3K8-vermittelte ERK-Signalübertragung ist essenziell für die B-Zellaktivierung und Immunglobulinsekretion.
• CD40 befindet sich überwiegend in der Zellmembran, durch alternatives Spleißen entsteht jedoch eine sezernierte Isoform.
• Das Protein ist ein Glykoprotein mit einem Signalpeptid, Disulfidbindungen und einer Transmembrandomäne.
• CD40 spielt eine entscheidende Rolle bei der adaptiven Immunität, insbesondere bei T-Zell-abhängigen B-Zellantworten.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen deckt die extrazelluläre Domäne (Aminosäuren 20-189) ab, weshalb dieser Antikörper für den Nachweis von zelloberflächenständigem CD40 durch Durchflusszytometrie geeignet ist.
• Für die Durchflusszytometrie sollten Sie den Antikörper titrieren, um die optimale Färbekonzentration für Ihren spezifischen Zelltyp und Versuchsaufbau zu ermitteln.
• Verwenden Sie eine passende PE-konjugierte Isotypkontrolle und einen Vitalfarbstoff, um die Spezifität zu gewährleisten und tote Zellen auszuschließen.
• Validieren Sie die Färbung an Maus-B-Zellen oder Makrophagen, bei denen die CD40-Expression gut charakterisiert ist.
• Bei Multiplexierung mit anderen Fluorophoren stellen Sie sicher, dass eine korrekte Kompensation durchgeführt wird, um spektrale Überlappungen zu vermeiden.
• Lagern Sie den Antikörper lichtgeschützt bei 2-8°C und vermeiden Sie wiederholte Gefrier-Auftau-Zyklen.

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