PE Kaninchen anti-Maus CD28 monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P31041

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD28-Funktion und -Lokalisierung

• CD28 ist ein T-Zell-spezifisches Oberflächenglykoprotein und ein Mitglied der Immunglobulin-Superfamilie, das als kostimulatorischer Rezeptor fungiert, der für eine effektive T-Zell-Aktivierung unerlässlich ist.
• Bei Bindung an seine Liganden CD80 (B7-1) oder CD86 (B7-2) liefert CD28 ein kritisches zweites Signal, das zusammen mit der TCR/CD3-Vernetzung die T-Zell-Proliferation, das Überleben und die Zytokinproduktion verstärkt (PubMed:7688139).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:7688139
• Diese Kostimulation führt zu einer erhöhten IL-2-Sekretion sowohl in CD4+- als auch in CD8+-T-Zell-Subsets und fördert in Verbindung mit CD40L die Produktion von IL-4 und IL-10.
• Auf molekularer Ebene rekrutiert die CD28-Vernetzung Signalmoleküle wie Proteinkinase C-theta (PRKCQ) und GRB2 und aktiviert NF-kappa-B über PI3K/Akt-abhängige und -unabhängige Wege.
• CD28 ist ein Transmembran-Glykoprotein, das eine extrazelluläre Immunglobulin-ähnliche Domäne, eine einzelne Transmembran-Helix und einen cytoplasmatischen Schwanz mit Signalmotiven enthält.
• Es lokalisiert ausschließlich an der Zellmembran und wird durch Phosphorylierung und Glykosylierung modifiziert, die seine Signalfunktionen regulieren.
• Schlüsselwörter: 3D-Struktur, Zellmembran, Disulfidbrücke, Glykoprotein, Immunglobulin-Domäne, Membran, Phosphoprotein, Rezeptor, Referenzproteom, Signal, Transmembran, Transmembran-Helix.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (Aminosäuren 20-149) von Maus-CD28, was darauf hindeutet, dass der Antikörper den nativen Oberflächenrezeptor erkennt.
• Für Anwendungen der Durchflusszytometrie titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Arbeitskonzentration für Ihren spezifischen Zelltyp zu bestimmen.
• Verwenden Sie geeignete Isotyp-Kontrollen und Vitalitätsfarbstoffe, um ein genaues Gating sicherzustellen und unspezifische Bindungen auszuschließen.
• Erwägen Sie eine Co-Färbung mit anti-CD3, um T-Zell-Subsets zu identifizieren, und validieren Sie das Färbemuster in aktivierten gegenüber ruhenden T-Zellen.
• Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle können die Epitop-Zugänglichkeit verändern; validieren Sie den Antikörper für intrazelluläre Färbungen, falls erforderlich.

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