PE Kaninchen anti-Maus CD117/c-Kit monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P05532

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von CD117/c-Kit

• CD117/c-Kit ist der Mastzellzell-/Stammzell-Wachstumsfaktor-Rezeptor Kit, eine Tyrosin-Proteinkinase, die durch das Kit-Gen bei Mäusen kodiert wird. Er fungiert als Rezeptor für den Stammzellfaktor (KITLG/SCF).
• Nach SCF-Bindung aktiviert Kit mehrere Signalkaskaden, einschließlich der PI3K/AKT1-, RAS/MAPK- und JAK/STAT-Wege, und reguliert das Zellüberleben, die Proliferation und die Differenzierung.
• Kit spielt eine entscheidende Rolle bei der Hämatopoese, der Aufrechterhaltung von Stammzellen, der Gametogenese, der Entwicklung, Migration und Funktion von Mastzellen sowie der Melanogenese.
• Der Rezeptor ist ein Transmembran-Glykoprotein mit immunglobulinähnlichen Domänen, das hauptsächlich an der Zellmembran lokalisiert ist, aber auch im Zytoplasma nachgewiesen werden kann.
• Isoform 1 ist weit verbreitet exprimiert, einschließlich in fetaler Leber und Knochenmark. Isoform 3 ist in hämatopoetischen Stammzellen angereichert. Andere Isoformen zeigen gewebsspezifische Expressionsmuster (z. B. Spermatogonien vs. Spermatiden).
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung, Glykosylierung und Ubiquitinierung, die die Aktivität und den Umsatz regulieren. Das Protein ist ein Proto-Onkogen und ein Mitglied der Familie der Rezeptor-Tyrosinkinasen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Der Antikörper ist direkt mit PE konjugiert, was ihn für einstufige Färbungen in der Durchflusszytometrie ohne Sekundärreagenz geeignet macht. Schützen Sie das Konjugat während der Handhabung und Lagerung vor Licht.
• Titrieren Sie den Antikörper in Ihrem spezifischen Zellsystem, um die optimale Konzentration für die Durchflusszytometrie zu bestimmen.
• Erwägen Sie eine Blockierung der Fc-Rezeptoren (z. B. mit anti-CD16/CD32-Antikörpern), um unspezifische Bindungen bei der Färbung von Mauszellen zu minimieren.
• Verwenden Sie einen Viabilitätsfarbstoff, um tote Zellen auszuschließen, da diese die Hintergrundfärbung erhöhen können.
• Das Immunogen deckt die extrazelluläre Domäne (Aminosäuren 25–523) ab, was darauf hindeutet, dass der Antikörper wahrscheinlich den nativen Oberflächenrezeptor erkennt; validieren Sie die Oberflächenfärbung in Ihrem experimentellen Modell.

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