PE-Kaninchen-anti-humaner/affenartiger Ki67-monoklonaler Antikörper für die intrazelluläre Durchflusszytometrie – P46013

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Ki67

• Ki67 ist ein großes nukleäres Protein, das vom MKI67-Gen kodiert wird und weithin als Marker für die Zellproliferation verwendet wird.
• Es verbindet sich mit der Oberfläche mitotischer Chromosomen und wirkt als Chromosomenabstoßer, um während der frühen Mitose die getrennte Verteilung einzelner Chromosomen aufrechtzuerhalten.
  Zugehörige Referenzen: PMID:27362226, PMID:32879492, PMID:35513709
• Während der frühen Mitose bildet Ki67 ausgedehnte bürstenartige Strukturen, die eine sterische und elektrostatische Barriere gegen den Kollaps der Chromosomen darstellen.
  Zugehörige Referenzen: PMID:27362226
• In der Anaphase löst die Dephosphorylierung einen funktionellen Wechsel aus: Ki67 wird zu einem Chromosomenanzieher und fördert durch eine RNA-abhängige Flüssig-Flüssig-Phasentrennung die Clusterbildung von Chromosomen.
  Zugehörige Referenzen: PMID:28935370, PMID:39153474
• Ki67 bindet an DNA, wobei es supercoiled DNA und AT-reiche DNA bevorzugt, und kann zur Organisation des Chromatins beitragen.
  Zugehörige Referenzen: PMID:10878551, PMID:24867636
• Während der Interphase befindet es sich im Zellkern und im Nukleolus und bedeckt während der Mitose die Chromosomenoberfläche.
• Das Protein durchläuft verschiedene posttranslationale Modifikationen, darunter Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitinierung, die seine mitotischen Funktionen regulieren.
• Als Produkt des MKI67-Gens steht die Ki67-Expression in engem Zusammenhang mit dem Fortschreiten des Zellzyklus und fehlt in ruhenden Zellen.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Da Ki67 ein nukleäres Antigen ist, erfordert die intrazelluläre Durchflusszytometrie eine effektive Fixierung und Permeabilisierung. Optimieren Sie die Permeabilisierungsschritte für Ihren Zelltyp.
• Der Antikörper wurde gegen ein synthetisches Peptid in der C-terminalen Region (AS 2271–2370) erzeugt. Stellen Sie sicher, dass dieses Epitop in Ihren Zielzellen oder Ihrem Zielgewebe vorhanden ist.
• Verwenden Sie bei der Durchflusszytometrie geeignete Isotypkontrollen und Kompensationseinstellungen für PE-konjugierte Antikörper.
• Dieser Antikörper zeigt eine Kreuzreaktivität mit dem Javaneraffen. Validieren Sie ihn in den relevanten Proben nichtmenschlicher Primaten, wenn er in der translationalen Forschung eingesetzt wird.
• Für Proliferationsstudien sollten Sie eine Ko-Färbung mit DNA-Gehalt-Farbstoffen (z. B. DAPI, Hoechst) oder anderen Zellzyklusmarkern in Betracht ziehen, um die Zellzyklusphasen zu unterscheiden.

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