PE Kaninchen anti-Human/Affe CD8a monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P01732

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: CD8a-Funktion und -Lokalisierung

• CD8a ist ein integrales Membranglykoprotein, das als Korezeptor für MHC-Klasse-I-Moleküle auf T-Zellen dient und Peptidantigene erkennt, die aus cytosolischen Proteinen stammen.
• Es interagiert gleichzeitig mit dem T-Zell-Rezeptor (TCR) und MHC Klasse I, rekrutiert die Src-Kinase LCK, um Signalwege einzuleiten, die zur T-Zell-Aktivierung, -Proliferation und zytotoxischen Reaktionen führen.
• In natürlichen Killerzellen (NK-Zellen) unterstützen CD8A-Homodimere an der Zelloberfläche die Konjugation und Lyse mehrerer Zielzellen und fördern das Überleben sowie die Differenzierung zu Gedächtnis-CD8-T-Zellen.
• Das Protein wird vorwiegend an der Zellmembran exprimiert, kann aber auch sezerniert werden. Zur Gewebeexpression gehören thymusabhängige T-Zellen (normalerweise als Heterodimer mit CD8B), NK-Zellen, Gedächtnis-T-Zellen, intraepitheliale Lymphozyten, Monozyten und dendritische Zellen.
• Es wird auch auf plasmazytoiden dendritischen Zellen nach Stimulation mit Herpes-simplex-Virus-1 nachgewiesen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung, Disulfidbrückenbildung und Palmitoylierung, die für seine Stabilität und Funktion wichtig sind.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, und Mutationen sind mit einer Krankheitsanfälligkeit verbunden.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen deckt die extrazelluläre Domäne (aa 22-182) ab, wodurch dieser Antikörper zur Detektion von nativem CD8a auf lebenden Zellen ohne Permeabilisierung geeignet ist.
• Titrieren Sie für die Durchflusszytometrie den Antikörper, um die optimale Konzentration für Ihren spezifischen Zelltyp und Ihre Färbebedingungen zu ermitteln, und fügen Sie geeignete Isotypkontrollen hinzu.
• Validieren Sie die Antikörperleistung mithilfe bekannter positiver Kontrollen (z. B. humane periphere Blut-T-Zellen) und negativer Kontrollen (z. B. CD8a-negative Zelllinien).
• Erwägen Sie die Verwendung dieses PE-konjugierten Antikörpers in Multicolor-Panels zusammen mit anderen Linienmarkern, um T-Zell-Subsets zu charakterisieren.

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