PE-Kaninchen-anti-humaner/affenartiger CD4-monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie – P01730

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: CD4-Funktion und -Lokalisierung

• Das vom CD4-Gen codierte T-Zell-Oberflächen-Glykoprotein CD4 (auch als T4 oder Leu-3 bezeichnet) ist ein integrales Membran-Glykoprotein mit einem Molekulargewicht von etwa 51 kDa, das immunoglobulinähnliche Domänen enthält.
• Es fungiert als Korezeptor für MHC-Klasse-II-Moleküle auf antigenpräsentierenden Zellen und interagiert gleichzeitig mit dem T-Zell-Rezeptor (TCR) und MHC-Klasse II, um die T-Zell-Aktivierung zu verstärken.
• Es rekrutiert die Src-Kinase LCK zum TCR-CD3-Komplex und initiiert intrazelluläre Signalkaskaden, die die Produktion von Lymphokinen, die Motilität, die Adhäsion und die Aktivierung von T-Helferzellen fördern.
• In Makrophagen und NK-Zellen ist CD4 über TCR-/LCK-unabhängige Signalwege an der Differenzierung, Aktivierung, Zytokinexpression und Zellmigration beteiligt; außerdem löst es die Differenzierung von Monozyten zu reifen Makrophagen aus.
• CD4 spielt eine entscheidende Rolle bei der Entwicklung von T-Helferzellen im Thymus und wird auf T-Helferzellen stark exprimiert; zusätzlich kommt es auf Makrophagen, dendritischen Zellen und NK-Zellen vor.
• Es dient als primärer Rezeptor für das humane Immundefizienzvirus 1 (HIV-1), wobei der Viruseintritt durch die Bindung von gp120 vermittelt wird; außerdem fungiert es als Rezeptor für das humane Herpesvirus 7 (HHV-7). Das HIV-1-Vpu-Protein reguliert die CD4-Expression herunter. Zugehörige Referenzen: PMID:12089508 PMID:16331979 PMID:2214026 PMID:17346169 PMID:7909607
• CD4 ist subzellulär in der Zellmembran lokalisiert und unterliegt posttranslationalen Modifikationen wie Disulfidbrückenbildung, Glykosylierung, Palmitoylierung und Phosphorylierung, die seine Funktion und Wechselwirkungen regulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Dieser PE-konjugierte monoklonale Antikörper (Klon nicht angegeben) wurde unter Verwendung von rekombinantem humanem CD4-Protein als Immunogen hergestellt und für Anwendungen in der Durchflusszytometrie (FC) validiert.
• Da der Antikörper bereits mit Phycoerythrin (PE) konjugiert ist, sollte eine längere Lichtexposition vermieden und für die Zellfärbung und Messung nach Standard-FC-Protokollen vorgegangen werden; zur Bestimmung der optimalen Arbeitskonzentration wird ein Titrationsexperiment empfohlen.
• Der Antikörper zeigt Kreuzreaktivität mit humanem und Cynomolgus-CD4; bei Verwendung anderer Spezies sollte die Kreuzreaktivität vor der Durchführung kritischer Experimente im entsprechenden Probensystem bestätigt werden.
• Für die intrazelluläre Färbung kann ein Fixierungs-/Permeabilisierungsschritt erforderlich sein; der Antikörper eignet sich für die Oberflächenfärbung lebender Zellen ohne Fixierung.

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