PE-Kaninchen anti-Mensch TLR3 monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie (intrazellulär) - O15455

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von TLR3

• Toll-ähnlicher Rezeptor 3 (TLR3), auch bekannt als CD283, ist ein einfach durchlässiges Membranprotein des Typs I, das zur Familie der Toll-ähnlichen Rezeptoren der Mustererkennungsrezeptoren gehört.
• Wirkt als zentraler Sensor für virale doppelsträngige RNA (dsRNA) und löst angeborene Immunantworten über den TRIF/TICAM1-Adaptorweg aus, was zur NF-κB-Aktivierung und nukleären Translokation von IRF3 sowie anschließender Produktion von proinflammatorischen Zytokinen und Typ-I-Interferonen führt.
• Das Protein enthält eine extrazelluläre Leucin-reiche Repeat (LRR)-Domäne, die für die Ligandenerkennung verantwortlich ist, eine Transmembranhelix und eine zytoplasmatische TIR (Toll/Interleukin-1-Rezeptor)-Domäne, die für die nachgeschaltete Signalübertragung essenziell ist.
• Lokalisiert hauptsächlich auf der Membran des endoplasmatischen Retikulums und in endosomalen Kompartimenten (einschließlich früher Endosomen), wo es auf internalisierte virale dsRNA trifft.
• TLR3 wird stark in Plazenta und Bauchspeicheldrüse exprimiert und ist der am stärksten exprimierte TLR im Gehirn, insbesondere in Astrozyten, Gliazellen und Neuronen. Es wird auch in CD11c+ unreifen dendritischen Zellen gefunden.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N-verknüpfte Glykosylierung, Phosphorylierung, Disulfidbindungsbildung und Ubiquitinierung (Isopeptidbindung) – alle tragen zur Rezeptorstabilität, zum Trafficking und zur Signalfähigkeit bei.
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen, und genetische Varianten in TLR3 wurden mit Krankheitsanfälligkeit assoziiert, einschließlich immunbedingter und neurologischer Erkrankungen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Der Antikörper wurde gegen ein rekombinantes Fragment entsprechend der extrazellulären Domäne (AS 24-339) generiert. Für die intrazelluläre Durchflusszytometrie sorgen Sie für geeignete Protokolle zur Zellfixierung und Permeabilisierung, damit der Antikörper Zugang zum Zielprotein erhält.
• Erwägen Sie eine Titrierung des Antikörpers, um die optimale Konzentration für Ihr spezifisches Versuchsaufbau zu bestimmen, da die Färbeefffizienz je nach Zelltyp und Fixierungsmethode variieren kann.
• Verwenden Sie geeignete biologische Kontrollen (z. B. unstimulierte vs. poly(I:C)-stimulierte Zellen) und Isotypkontrollen, um die Spezifität der Färbung zu bestätigen.

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