PE-kaninchen anti-human TIGIT monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - Q495A1

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von TIGIT

• TIGIT (T-Zell-Immunrezeptor mit Ig- und ITIM-Domänen) ist ein inhibitorischer Rezeptor der Immunglobulin-Superfamilie, auch bekannt als VSIG9 und VSTM3, der Immunantworten moduliert, hauptsächlich indem er die T-Zell-Aktivierung unterdrückt, indem er reife immunregulatorische dendritische Zellen fördert. Verwandte Referenzen: PMID:19011627
• Er bindet mit hoher Affinität an den Poliovirus-Rezeptor PVR/CD155 und Nectin-2/CD112 auf antigenpräsentierenden Zellen und übermittelt inhibitorische Signale an T-Zellen und NK-Zellen; die Ligandenbindung löst die Phosphorylierung seines zytoplasmatischen Schwanzes durch die Src-Kinasen FYN oder LCK aus, rekrutiert GRB2 und die Phosphatase SHIP1, um die PI3K- und MAPK-Signalwege zu dämpfen. Verwandte Referenzen: PMID:23154388
• Darüber hinaus assoziiert TIGIT mit β-Arrestin-2/ARRB2, um SHIP1 zu rekrutieren, das die Autoubiquitinierung von TRAF6 unterdrückt und folglich die NF-κB-Signalkaskade hemmt. Verwandte Referenzen: PMID:24817116
• Es wirkt auch als funktioneller Rezeptor für Nectin-4, um die Zytotoxizität von NK-Zellen zu hemmen, was sein Repertoire an Immun-Checkpoints erweitert. Verwandte Referenzen: PMID:32503945
• Auf Proteinebene wird TIGIT in geringen Mengen auf peripheren Gedächtnis- und regulatorischen CD4+-T-Zellen und NK-Zellen exprimiert und wird nach Aktivierung dieser Zellen deutlich hochreguliert.
• Subzellulär lokalisiert es sich als einpassiges Transmembranprotein des Typs I in der Zellmembran.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung, Disulfidbindungsbildung und Phosphorylierung, die für seine Signalfunktionen essenziell sind.
• Alternatives Spleißen erzeugt Isoformen des Rezeptors, das Protein gehört zum Referenzproteom mit einer berechneten Molekularmasse von etwa 26,3 kDa.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Dieser PE-konjugierte kaninchener monoklonale Antikörper ist für die direkte durchflusszytometrische (FC) Detektion von humanem TIGIT auf lebenden Zellen konzipiert; es ist keine sekundäre Färbung erforderlich.
• Da das rekombinante Immunogen die extrazelluläre Domäne (Aminosäuren 22–141) umfasst, erkennt der Antikörper wahrscheinlich ein Epitop innerhalb der ligandbindenden Region; erwägen Sie Blockierungsexperimente mit PVR/CD155 oder Nectin-2, um die Spezifität zu bestätigen.
• Da die Expression von TIGIT auf ruhenden Zellen gering ist und bei Aktivierung hochreguliert wird, schließen Sie einen geeigneten Aktivierungsschritt ein (z. B. anti-CD3/CD28-Stimulation für T-Zellen oder IL-2 für NK-Zellen), um das Signal zu maximieren.
• Titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Arbeitskonzentration für Ihre spezifische Zellart und Versuchsbedingungen zu bestimmen, und verwenden Sie immer geeignete Isotypkontrollen.

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