PE-Kaninchen-anti-humaner-Siglec-8-monoklonaler Antikörper für FC – Q9NYZ4

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Siglec-8

• Siglec-8, auch als SAF-2 (Mitglied 2 der Sialoadhäsin-Familie) bekannt, ist ein einteiliges Typ-I-Membranglykoprotein, das zur Immunglobulin-Superfamilie gehört. Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen.
• Siglec-8 vermittelt die sialinsäureabhängige Adhäsion an Blutzellen und bindet bevorzugt α-2,3-verknüpfte Sialinsäure mit einer gewissen Affinität zu α-2,6-Verknüpfungen; Cis-Interaktionen auf derselben Zelloberfläche können die Ligandenbindungsstelle maskieren. Zugehörige Referenzen: PMID:10625619, PMID:10856141
• Es erkennt spezifisch terminale N-Acetylneuraminsäure (Sialinsäure) und die darunterliegende 6-O-sulfatierte Galaktose, mit einer starken Präferenz für Gal-6-sulfatierte Sialyl-Lewis-X-Glykan-Epitope. Zugehörige Referenzen: PMID:27357658
• Das Protein wird überwiegend auf der Oberfläche von Eosinophilen, Basophilen und Mastzellen exprimiert und ist daher ein spezifischer Marker für diese Zelltypen in hämatopoetischen Untersuchungen.
• Die subzelluläre Lokalisation befindet sich hauptsächlich an der Plasmamembran, was mit seiner Rolle bei Zell-Zell-Interaktionen und der Signalübertragung übereinstimmt.
• Siglec-8 enthält immunglobulinähnliche Domänen und Disulfidbrücken, wie sie für Adhäsionsmoleküle typisch sind, und wird posttranslational durch Glykosylierung modifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (Aminosäuren 17–363), was darauf hindeutet, dass der Antikörper wahrscheinlich oberflächenexponierte Epitope erkennt und sich daher für die Durchflusszytometrie an lebenden, nicht permeabilisierten Zellen eignet.
• Für Anwendungen in der Durchflusszytometrie sollte der PE-konjugierte Antikörper titriert werden, um die optimale Färbekonzentration anhand relevanter Zelllinien oder Primärzellen zu bestimmen, von denen bekannt ist, dass sie Siglec-8 exprimieren (z. B. Eosinophilen-, Basophilen- oder Mastzellpopulationen).
• Geeignete Isotypkontrollen und Schritte zur Blockierung von Fc-Rezeptoren sollten einbezogen werden, um die unspezifische Bindung zu minimieren.
• Die Spezifität der Färbung sollte im vorgesehenen Probensystem validiert werden, wobei die berichtete Expression von Siglec-8 auf humanen Basophilen, Eosinophilen und Mastzellen zu berücksichtigen ist.
• Beachten Sie, dass mehrere Proteinisoformen existieren (44, 46, 54 kDa), das PE-Konjugat jedoch für den Nachweis auf der Zelloberfläche entwickelt wurde und keine Unterscheidung der Molekulargewichtsvarianten ermöglicht.

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