PE Kaninchen anti-Human Podoplanin Monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - Q86YL7

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Podoplanin-Funktion und -Lokalisierung

• Podoplanin (PDPN), auch bekannt als Aggrus, Gp36 und T1-alpha, ist ein stark O-glykosyliertes transmembranes Glykoprotein, das eine entscheidende Rolle bei der Zelladhäsion, Migration und dem epithelial-mesenchymalen Übergang (EMT) spielt.
• Während der Entwicklung vermittelt PDPN die Trennung von Blut- und Lymphgefäßen durch Bindung an CLEC1B auf Blutplättchen, was die Plättchenaktivierung und -aggregation auslöst. Verwandte Referenzen: PMID:14522983 PMID:15231832 PMID:17222411
• Die Wechselwirkung mit CD9 schwächt die PDPN-induzierte Plättchenaggregation ab und hebt einen Regulationsmechanismus bei Thrombosen hervor. Verwandte Referenzen: PMID:18541721
• Durch Bindung an MSN oder EZR fördert PDPN den EMT durch Auslösung der RHOA-Aktivierung, was die Migration und Invasivität von Tumorzellen verstärkt. Verwandte Referenzen: PMID:17046996 PMID:21376833
• PDPN interagiert mit CD44, um die gerichtete Zellmigration sowohl in normalen epithelialen als auch in tumoralen Kontexten voranzutreiben. Verwandte Referenzen: PMID:20962267
• In Keratinozyten induziert PDPN dramatische morphologische Veränderungen, einschließlich gestreckter Form, Membranausläufern und erhöhter Beweglichkeit, während es die Zelladhäsion verringert. Verwandte Referenzen: PMID:15515019
• PDPN steuert die Stabilität von Invadopodien und den Abbau der extrazellulären Matrix (ECM) in Tumorzellen über die RHOC-ROCK-LIMK-CFL1-Signalachse und erleichtert so die Metastasierung. Verwandte Referenzen: PMID:25486435
• PDPN lokalisiert in spezifischen Membrandomänen wie Lamellipodien, Filopodien, Mikrovilli, Ruffles und Membran-Rafts und findet sich auch im Zytoplasma; es ist hochexprimiert in Plazenta, Lunge und Skelettmuskel, schwach exprimiert in Gehirn, Niere und Leber und ist in kolorektalen und oralen Plattenepithelkarzinomen hochreguliert. Das Protein hat ein vorhergesagtes Molekulargewicht von ~17 kDa, läuft aber aufgrund umfangreicher Glykosylierung und Sialinsäuremodifikation bei 36–43 kDa.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (Aminosäuren 21–123), was darauf hindeutet, dass der Antikörper das native Oberflächenepitop erkennt; es eignet sich gut für die Durchflusszytometrie (FC) zum Nachweis von PDPN auf lebenden Zellen.
• Da dieser Antikörper direkt mit Phycoerythrin (PE) konjugiert ist, wird eine Titration empfohlen, um die optimale Färbekonzentration ohne die Notwendigkeit eines sekundären Antikörpers zu bestimmen.
• Fügen Sie geeignete ungefärbte und Isotyp-Kontrolle-Proben hinzu, um Gates zu setzen und die Hintergrundfluoreszenz in FC-Experimenten zu bewerten.
• Validieren Sie die Antikörperleistung in bekannten PDPN-exprimierenden Zelllinien (z. B. Lungen- oder Plazentazellen) und erwägen Sie die Verwendung von PDPN-überexprimierenden Zellen als positive Kontrolle.

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