PE Kaninchen Anti-Mensch Phospho-Histon H2AX-S139 Monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie – P16104

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Histon H2AX

• Histon H2AX ist eine Variante des Histons H2A, die herkömmliches H2A in einer Untergruppe von Nukleosomen ersetzt.
• Es spielt eine zentrale Rolle bei der Transkriptionsregulation, DNA-Reparatur, DNA-Replikation und chromosomalen Stabilität, indem es DNA zu Chromatin kompaktiert.
• H2AX ist entscheidend für die DNA-Schadensantwort; nach Doppelstrangbrüchen wird es schnell an Serin139 (γ-H2AX) phosphoryliert und bildet Foki, die Reparaturproteine rekrutieren.
• Es ist erforderlich für die checkpunktvermittelte Zellzyklusarretierung als Reaktion auf niedrige Dosen ionisierender Strahlung.
• Die subzelluläre Lokalisation ist nukleär, insbesondere auf Chromosomen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitinierung, die seine Funktion bei DNA-Reparatur und Chromatin-Dynamik regulieren.
• Es kann auch eine Rolle bei der Meiose und bei Wirt-Virus-Interaktionen spielen.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Da der Antikörper eine Phosphorylierungsstelle erkennt, sollten Sie während der Zellpräparation und Färbung Phosphatase-Inhibitoren hinzufügen.
• Für die intrazelluläre Durchflusszytometrie sollten geeignete Fixierungs- und Permeabilisierungspuffer optimiert werden, um das Phospho-Epitop zu erhalten.
• Die PE-Konjugation ermöglicht eine direkte Detektion; vermeiden Sie die Verwendung von PE-konjugierten Sekundärantikörpern.
• Validieren Sie den Antikörper in relevanten Positiv- und Negativkontrollproben, wie z. B. bestrahlten versus unbehandelten Zellen.
• Titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Färbekonzentration für Ihre spezifische Versuchsanordnung zu ermitteln.

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