PE Kaninchen anti-Human LGR5 (GPR49) monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - O75473

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: LGR5-Funktion und -Lokalisierung

• LGR5, auch bekannt als GPR49, GPR67 und HG38, ist ein G-Protein-gekoppelter Rezeptor mit Leucin-reichen Wiederholungen, der als Rezeptor für R-Spondine fungiert.
• Er verstärkt den kanonischen Wnt-Signalweg durch Assoziation mit phosphoryliertem LRP6 und Frizzled-Rezeptoren nach Bindung von R-Spondin, wodurch die Expression der Zielgene erhöht wird.
• Im Gegensatz zu klassischen GPCRs aktiviert LGR5 keine heterotrimeren G-Proteine zur Signaltransduktion.
• LGR5 ist ein etablierter Stammzellmarker für das intestinale Epithel und den Haarfollikel und spielt eine entscheidende Rolle bei der Entwicklung und Aufrechterhaltung von adulten intestinalen Stammzellen während der postembryonalen Entwicklung.
• Intrazellulär lokalisiert LGR5 an der Zellmembran, dem Golgi-Apparat und der Membran des trans-Golgi-Netzwerks.
• Er wird in Skelettmuskel, Plazenta, Rückenmark und Hirnregionen exprimiert und spezifisch an der Basis der Krypten in Stammzellen der Dick- und Dünndarmschleimhaut; eine Überexpression wird bei Eierstock-, Dickdarm- und Leberkrebs beobachtet.
• Das Protein unterliegt alternativem Spleißen und enthält wichtige strukturelle Merkmale wie Disulfidbrücken, einen Glykoprotein-Charakter, Leucin-reiche Wiederholungen und sieben transmembrane Helices.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einer C-terminalen intrazellulären Region (Aminosäuren 480-580), was möglicherweise für die Detektion der Gesamt-LGR5-Expression geeignet ist; überprüfen Sie die Zugänglichkeit des Epitops in Ihrem Durchflusszytometrie-Protokoll.
• Für die Durchflusszytometrie stellen Sie sicher, dass eine geeignete Zellpermeabilisierung durchgeführt wird, wenn intrazelluläre Epitope angezielt werden, oder verwenden Sie Protokolle zur Oberflächenfärbung, wenn das Epitop oberflächenexponiert ist.
• Validieren Sie die Antikörperleistung in relevanten Zelltypen, von denen bekannt ist, dass sie LGR5 exprimieren, wie z. B. intestinale Organoiden, kolorektale Krebszelllinien oder Haarfollikelzellen, und schließen Sie positive und negative Kontrollen ein.
• Da die LGR5-Expression in einigen Stammzellpopulationen niedrig ist, erwägen Sie Strategien zur Signalverstärkung oder die Verwendung von rekombinanten Proteinkontrollen, um die Detektion zu optimieren.

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