PE Kaninchen anti-Human IgG (Fc) Monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P01857

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Immunglobulin-Schwerkette-Konstant Gamma 1 (IGHG1)

• IGHG1 kodiert die konstante Region der Gamma-1-Schwerkette; alternatives Spleißen erzeugt sowohl membrangebundene (B-Zell-Rezeptor) als auch sezernierte (Antikörper) Isoformen.
• Membrangebundenes IgG1 dient als Antigenrezeptor auf B-Lymphozyten; die Antigenbindung löst die klonale Expansion und Differenzierung zu Plasmazellen aus.
  Verwandte Referenzen: PMID:17576170 PMID:20176268 PMID:22158414
• Sezernierte IgG1-Antikörper binden Antigene mit hoher Affinität, erreicht durch V(D)J-Rekombination, somatische Hypermutation und Affinitätsreifung.
  Verwandte Referenzen: PMID:17576170 PMID:20176268 PMID:22158414
• Die Fc-Region von IgG1 interagiert mit Fcγ-Rezeptoren auf Zellen des angeborenen Immunsystems und mit Komplement C1q, um Effektorfunktionen wie antikörperabhängige zelluläre Zytotoxizität (ADCC), Phagozytose und komplementabhängige Zytotoxizität (CDC) zu vermitteln.
• IgG1 ist ein Glykoprotein, das intra- und interkettige Disulfidbrücken enthält, die die Immunglobulin-Faltung stabilisieren.
• Das Protein befindet sich an der Zellmembran als Teil des B-Zell-Rezeptors und wird als löslicher Antikörper sezerniert.
• Der Klassenwechsel-Rekombination ersetzt die konstante Region von IgM/IgD durch die von IgG1, wodurch B-Zellen ihren Isotyp wechseln und ihre Effektorfunktionen anpassen können.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Titrieren Sie den Antikörper im vorgesehenen Zellsystem, um die optimale Konzentration für die Durchflusszytometrie zu ermitteln.
• Erwägen Sie eine Vorinkubation der Zellen mit einem Fc-Rezeptor-Blockierungsreagenz, um unspezifische Bindungen zu minimieren, wenn Sie mit Fc-Rezeptor-exprimierenden Zellen arbeiten.
• Fügen Sie geeignete Kompensationskontrollen (Einfachfärbung und Fluoreszenz-minus-eins) für den PE-Kanal hinzu, um eine genaue Datenanalyse zu gewährleisten.
• Überprüfen Sie die Reaktivität in humanen Proben; die Kreuzreaktivität mit anderen Spezies wurde nicht bestimmt. Validieren Sie experimentell, wenn Sie es auf Zellen von nichtmenschlichen Primaten verwenden.
• Schützen Sie den Antikörper vor längerer Lichteinwirkung, um die Stabilität der PE-Fluoreszenz zu erhalten.

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