PE-Kaninchen anti-Mensch FGFR3 monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P22607

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: FGFR3-Funktion und Lokalisierung

• FGFR3 ist eine Tyrosinkinase-Rezeptor auf der Zelloberfläche für Fibroblastenwachstumsfaktoren, der Proliferation, Differenzierung und Apoptose steuert.
• Es ist essenziell für die Chondrozytendifferenzierung und eine korrekte Skelettentwicklung; Gain-of-Funktion-Mutationen verursachen Achondroplasie und verwandte Zwergwüchsigkeiten.
• Ligandenbindung löst Autophosphorylierung aus und aktiviert die nachgeschaltete Signalgebung über FRS2, was zur RAS-MAPK- und AKT-Signalwege führt; zudem erfolgt eine Phosphorylierung von PLCG1.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, darunter eine sezernierte Isoform 3, die FGFs bindet und die Signalgebung antagonisieren kann.
• Der vollständige Rezeptor lokalisiert hauptsächlich zur Zellmembran, mit zusätzlichen Anteilen in cytoplasmatischen Vesikeln und dem endoplasmatischen Retikulum; die sezernierte Isoform befindet sich extrazellulär.
• Posttranslationelle Modifikationen umfassen Glykosylierung, Disulfidbindungen zur Stabilisierung der immunglobulinähnlichen Domänen sowie Phosphorylierung im Rahmen der Kinaseaktivierung; Ubiquitinierung reguliert den Rezeptorabbau.
• Hohe Expression wird in Gehirn, Niere und Hoden beobachtet, während die Expression in Milz, Herz und Muskel gering ist; fetale Gewebe zeigen erhöhte Spiegel in Niere, Lunge, Darm und Gehirn.
• Erkrankungen: Aktivierende FGFR3-Mutationen sind mit Skelettdysplasien, Kraniosynostose und Taubheit verbunden; Überexpression oder konstitutive Aktivierung wird bei Blasenkrebs, multiplem Myelom und anderen bösartigen Erkrankungen beobachtet.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (Aminossäuren 23-375), was darauf hindeutet, dass der Antikörper ein Epitop auf der Zelloberfläche erkennt – kompatibel mit der Durchflusszytometrie an lebenden Zellen.
• Verwenden Sie für die Durchflusszytometrie FGFR3-positive humane Zelllinien (z. B. RT4 Blasenkarzinom) und schließen Sie geeignete Isotypkontrollen ein; titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Färbekonzentration zu bestimmen.
• Prüfen Sie die Kreuzreaktivität mit anderen FGFR-Familienmitgliedern bei Multiplex-Assays; bestätigen Sie die Spezifität durch Knockout- oder Knockdown-Validierung in Ihrem System.
• Fixierung und Permeabilisierung können die Detektion intrazellulärer Rezeptorpools ermöglichen, können aber die Epitopzugänglichkeit verändern; bewerten Sie Fixierungsprotokolle sorgfältig.
• Beachten Sie das Vorhandensein mehrerer Isoformen; wählen Sie bei Bedarf validierte Referenzzelllinien oder rekombinante Proteinkontrollen zur Überprüfung der Isoformerkennung aus.

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