PE Kaninchen anti-Human Komplement C3 monoklonaler Antikörper für FC - P01024

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Komplement C3

• C3 ist ein Vorläuferprotein von ca. 187 kDa, das posttranslational in die funktionellen Fragmente C3a (Anaphylatoxin) und C3b (Opsonin) gespalten wird. Das C3b-Fragment enthält eine reaktive Thioesterbindung, die eine kovalente Bindung an Pathogenoberflächen ermöglicht.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:6903192

• C3b opsonisiert Pathogene und dient als nicht-enzymatische Komponente der C5-Konvertase sowohl im klassischen als auch im alternativen Komplementweg, was für die Phagozytose und die Immun Clearance entscheidend ist.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:28264884, PMID:31507604, PMID:3653927, PMID:12878586, PMID:18204047, PMID:2387864

• Das C3a-Anaphylatoxin vermittelt lokale Entzündungen durch Bindung an seinen Rezeptor C3AR1, was die Degranulation von Mastzellen und Basophilen, die Freisetzung von Zytokinen und die Signalgebung über G-Protein-gekoppelte Rezeptoren auslöst.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:6968751, PMID:37169960, PMID:37852260, PMID:8702752, PMID:23383423

• C3a wirkt auch als potenter Chemotaktikum für Makrophagen und Neutrophile und lenkt deren Migration zu entzündetem Gewebe.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:23383423, PMID:342601, PMID:5778786

• Über die Immunität hinaus fungiert C3 (auch bekannt als Acylation-Stimulating Protein, ASP) als ein adipogenes Hormon, das die Triglyceridsynthese und den Glucosetransport in Adipozyten über den C5AR2-Rezeptor stimuliert und so die postprandiale Lipidclearance reguliert.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:10432298, PMID:15833747, PMID:16333141, PMID:11773063, PMID:12540846, PMID:19615750

• C3 wird primär in das Plasma sezerniert und von Hepatozyten und Adipozyten produziert. Nach Aktivierung des Komplementsystems wird C3b auf Zelloberflächen abgelagert, was den Nachweis mittels Durchflusszytometrie an entsprechenden Zelltypen ermöglicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen deckt die Aminosäuren 1498–1663 von humanem C3 ab, eine Region innerhalb der C-terminalen C345C-Domäne, die an die C5-Bindung und die Konvertase-Bildung beteiligt ist. Dieses Design kann den Nachweis von volllängigem C3 und der C3b α'-Kette begünstigen.
• Als PE-konjugierter Antikörper ist er für die direkte Durchflusszytometrie ohne Sekundärreagenzien einsatzbereit. Für ein optimales Signal titrieren Sie den Antikörper (z. B. 0,5–5 µg pro 10^6 Zellen) und verwenden Sie geeignete Isotyp-Kontrollen.
• Da C3 ein sekretiertes Protein ist, sollten Sie eine Fixierung und Permeabilisierung in Betracht ziehen, wenn eine intrazelluläre Färbung von C3-produzierenden Zellen (z. B. Hepatozyten, Adipozyten) erforderlich ist. Für den Oberflächennachweis von C3b-Ablagerungen auf Zielzellen ist keine Permeabilisierung erforderlich.
• Validieren Sie den Assay in Ihrem spezifischen Probensystem, wie z. B. menschliches Vollblut, periphere Blutmononukleäre Zellen (PBMCs) oder gereinigte Zellpopulationen, und bestätigen Sie, dass die Kreuzreaktivität wie angegeben auf humanes C3 beschränkt ist.

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