PE Kaninchen Anti-Mensch CD8b Monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P10966

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD8b

• CD8b, auch bekannt als CD8-beta-Kette, ist ein T-Zell-Oberflächenglykoprotein, das zur Immunglobulin-Superfamilie gehört. Es existiert in mehreren Isoformen (Isoform 1, 3, 5, 6, 7, 8), die durch alternatives Spleißen entstehen.
• CD8b bildet Heterodimere mit der CD8-alpha-Kette und fungiert als Korezeptor für MHC-Klasse-I-Peptid-Komplexe auf antigenpräsentierenden Zellen.
• Nach der Bindung an MHC Klasse I rekrutiert CD8b die Src-Kinase LCK zum TCR-CD3-Komplex und initiiert intrazelluläre Signalkaskaden, die die T-Zell-Aktivierung, Proliferation und zytotoxische Funktion fördern.
• Der zytoplasmatische Schwanz von CD8b enthält eine Palmitoylierungsstelle, die das Protein zu Lipidflößen dirigiert, Signalmoleküle konzentriert und die Effizienz der Signaltransduktion erhöht.
• CD8b ist entscheidend für die thymische Selektion von CD8+-T-Zellen und gewährleistet die korrekte Entwicklung des Repertoires an zytotoxischen T-Lymphozyten.
• Subzellulär lokalisiert sich CD8b hauptsächlich zur Plasmamembran, aber es wurden auch sezernierte Isoformen nachgewiesen.
• Die Gewebeexpression ist auf Thymus und periphere CD8+-T-Zellen beschränkt, wobei bestimmte Isoformen eine bevorzugte Expression in thymischen gegenüber peripheren Populationen aufweisen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N-verknüpfte Glykosylierung, Disulfidbrückenbildung und Phosphorylierung, die die Proteinstabilität und Interaktionseigenschaften regulieren können.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen wurde gegen die extrazelluläre Domäne (Aa 22-170) von humanem CD8b entworfen, die die immunglobulinähnliche V-Typ-Domäne umfasst, die für die MHC-I-Wechselwirkung kritisch ist. Dies macht es geeignet, oberflächenexprimiertes CD8b durch Durchflusszytometrie nachzuweisen.
• Da dieser Antikörper für die Durchflusszytometrie validiert ist, kann er für die Immunphänotypisierung von T-Zell-Subpopulationen verwendet werden, führen Sie jedoch Titrationsexperimente durch, um die optimale Konzentration zu bestimmen.
• Da der Antikörper direkt mit PE (Phycoerythrin) konjugiert ist, sorgen Sie für korrekte Kompensationseinstellungen in mehrfarbigen durchflusszytometrischen Panels, insbesondere bei der Co-Färbung mit FITC oder APC.
• Für andere Anwendungen wie Western Blot oder Immunhistochemie muss der Antikörper möglicherweise neu validiert werden, da das PE-Konjugat und die Antigenerkennung unterschiedlich funktionieren können.
• Verwenden Sie geeignete Isotypkontrollen und Viabilitätsfarbstoffe in durchflusszytometrischen Experimenten, um spezifische CD8b-Färbung von Hintergrundsignalen zu unterscheiden.

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