PE-Kaninchen-anti-humanes CD8 PolymAb® monoklonaler Antikörper für FC – P01732 / P10966

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD8

• Das CD8A-Gen codiert die T-Zell-Oberflächen-Glykoprotein-CD8-Alpha-Kette, die auch als T-Lymphozyten-Differenzierungsantigen T8/Leu-2 bekannt ist.
• CD8 fungiert als integrales Membran-Glykoprotein und Korezeptor für MHC-Klasse-I-Moleküle, indem es gleichzeitig an den T-Zell-Rezeptor (TCR) und den MHC-Klasse-I:Peptid-Komplex auf antigenpräsentierenden Zellen bindet.
• Bei der Interaktion mit MHC-Klasse I rekrutiert CD8 die Src-Kinase LCK zum TCR-CD3-Komplex und initiiert dadurch eine intrazelluläre Signalübertragung, die die Aktivierung von Lymphozyten, die Zytokinproduktion und die Effektorfunktionen zytotoxischer T-Zellen (CTL) fördert.
• CD8A wird auf T-Zellen thymischen Ursprungs hauptsächlich als disulfidverknüpftes Heterodimer mit CD8B exprimiert, kann jedoch auch CD8A-Homodimere auf Subpopulationen natürlicher Killerzellen (NK-Zellen), Gedächtnis-T-Zellen, intraepithelialen Lymphozyten, Monozyten und dendritischen Zellen bilden.
• Das CD8A-Homodimer auf NK-Zellen unterstützt einen Überlebensmechanismus, der die Konjugation und Lyse mehrerer Zielzellen ermöglicht, und fördert außerdem die Differenzierung aktivierter Lymphozyten zu CD8-Gedächtnis-T-Zellen.
• CD8A lokalisiert als einfach durchspannendes Transmembranprotein vom Typ I in der Zellmembran; außerdem wurde eine sezernierte Form identifiziert.
• Zu den wesentlichen posttranslationalen Modifikationen gehören alternatives Spleißen, Disulfidbrückenbildung, N-Glykosylierung und Palmitoylierung an einem membrannahen Cysteinrest, die für Struktur und Funktion des Proteins entscheidend sind.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Titrieren Sie den Antikörper für durchflusszytometrische Analysen, um die optimale Arbeitsverdünnung für Ihr spezifisches experimentelles System und Ihren Zelltyp zu bestimmen.
• Verwenden Sie geeignete Isotypkontrollen und Fluoreszenz-minus-eins-Kontrollen (FMO), um den Hintergrund zu beurteilen und eine korrekte Gating-Strategie festzulegen.
• Schützen Sie den PE-konjugierten Antikörper während der Handhabung und Lagerung vor Licht, um ein Ausbleichen durch Photobleaching zu verhindern.
• Dieser Antikörper erkennt sowohl CD8A- als auch CD8B-Ketten. Berücksichtigen Sie seine Eignung zur Identifizierung von CD8+-T-Zell-Subpopulationen und anderen CD8-exprimierenden Populationen wie NK-Zellen und dendritischen Zellen in mononukleären Zellen des peripheren Blutes (PBMCs) des Menschen.
• Führen Sie die Oberflächenfärbung lebender Zellen unter Standardbedingungen durch. Vermeiden Sie nach Möglichkeit eine Fixierung vor der Färbung, da es zu einer Maskierung von Epitopen kommen kann.

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