PE Kaninchen anti-Human CD52 monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P31358

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: CD52-Funktion und Lokalisierung

• CD52, auch bekannt als CAMPATH-1-Antigen, HE5, CDW52 und EDDM5, ist ein GPI-verankertes Glykoprotein, das vorwiegend auf der Zellmembran zu finden ist.
• Das Protein wird als kleines, matures Peptid mit einem Molekulargewicht von ca. 7 kDa exprimiert, das über ein Glycosylphosphatidylinositol (GPI)-Molekül an die Lipiddoppelschicht verankert ist.
• Funktionelle Studien deuten darauf hin, dass CD52 eine Rolle bei der Präsentation und Ausrichtung von Kohlenhydraten spielen könnte, obwohl seine genaue biologische Funktion noch vollständig geklärt werden muss.
• CD52 wurde ursprünglich als Cambridge-Pathologie-1-Antigen identifiziert und wird auch als epididymales Sekretprotein (HE5) erkannt, was auf gewebsspezifische Rollen im Nebenhoden hinweist.
• Die extrazelluläre N-terminale Region, die das verwendete Peptidimmunogen enthält, ist für die Antikörperbindung zugänglich, wodurch CD52 ein geeignetes Ziel für die durchflusszytometrische Detektion an lebenden Zellen darstellt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N-verknüpfte Glykosylierung, und das Protein ist ausschließlich über einen GPI-Anker an die Membran gebunden, was es als Lipoprotein klassifiziert.
• Schlüsselwörter, die mit CD52 verbunden sind, umfassen direkte Proteinsequenzierung, 3D-Struktur und Referenzproteom, was seine gut charakterisierten biochemischen Eigenschaften widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (Aminosäuren 1–61) von humanem CD52, die extrazellulär liegt und auf intakten Zellen exponiert ist, was die Eignung des Antikörpers für die Durchflusszytometrie an lebenden Zellen unterstützt.
• Da es sich um einen PE-konjugierten primären Antikörper handelt, ist keine sekundäre Färbung erforderlich; die direkte Detektion ermöglicht eine vereinfachte Gestaltung von Multicolor-Panels in Durchflusszytometrie-Experimenten.
• Erwägen Sie eine Titrierung des Antikörpers, um die optimale Konzentration für Ihren spezifischen Zelltyp und Ihr Instrument zu bestimmen, und fügen Sie geeignete Isotypkontrollen hinzu, um unspezifische Bindungen zu bewerten.
• Validieren Sie die Antikörperreaktivität auf bekannten CD52-positiven Zellen, wie menschlichen Lymphozyten oder Nebenhodenepithelzelllinien, und schließen Sie eine Negativkontrolle (z. B. CD52-Knockout oder nicht-menschliche Zellen) ein, um die Spezifität zu bestätigen.
• Für die Färbung der Zelloberfläche inkubieren Sie mit dem Antikörper bei 4 °C in Anwesenheit eines Fc-Blocks, um potenziellen Hintergrund vor der durchflusszytometrischen Erfassung zu reduzieren.

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