PE-Kaninchen-anti-humaner-CD4-monoklonaler Antikörper für FC – P01730

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD4 (CD4-T-Zelloberflächen-Glykoprotein)

• CD4 ist ein integrales Membran-Glykoprotein, das als Korezeptor für MHC-Klasse-II-Moleküle fungiert und eine entscheidende Rolle bei der T-Zell-Aktivierung und Immunantwort spielt.
• Bei der Bindung an Peptid-MHC-Klasse II rekrutiert CD4 die Src-Kinase LCK zum TCR-CD3-Komplex und initiiert intrazelluläre Signalkaskaden, die die Produktion von Lymphokinen, die Adhäsion und die Differenzierung von T-Helferzellen fördern.
• CD4 wird auch auf anderen Immunzellen exprimiert, darunter Makrophagen, dendritische Zellen und NK-Zellen, wo es über TCR-unabhängige Signalwege die Differenzierung, Zytokinexpression und Migration moduliert.
• CD4 ist der primäre Rezeptor für das humane Immundefizienzvirus 1 (HIV-1), bindet an das virale Hüllglykoprotein gp120 und wird durch das HIV-1-Akzessorprotein Vpu herunterreguliert.
  Verwandte Referenzen: PMID:12089508, PMID:16331979, PMID:2214026, PMID:17346169
• Zusätzlich fungiert CD4 als Rezeptor für das humane Herpesvirus 7 (HHV-7).
  Verwandte Referenzen: PMID:7909607
• Das Protein wird stark auf der Oberfläche von T-Helferzellen exprimiert, die auf die Regulation der Aktivität zytotoxischer T-Zellen, die B-Zell-Reifung und die Aktivierung von Phagozyten spezialisiert sind.
• CD4 ist ein Single-Pass-Membranprotein vom Typ I mit vier extrazellulären, immunglobulinähnlichen Domänen, das durch eine Transmembranhelix an der Zellmembran verankert ist.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören die N-Glykosylierung, die Palmitoylierung membrannaher Cysteine und die Phosphorylierung des zytoplasmatischen Schwanzes, welche die Rezeptorclusterbildung und Signalübertragung regulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen, bestehend aus den Aminosäuren 26–207, entspricht der extrazellulären Domäne von CD4 einschließlich der N-terminalen, immunglobulinähnlichen Domänen, die für die Bindung an MHC-Klasse II und HIV-gp120 verantwortlich sind. Forschende sollten mögliche Konkurrenz- oder Blockierungseffekte in funktionellen Assays berücksichtigen.
• Für die Durchflusszytometrie sollte der Antikörper titriert werden, um die optimale Färbekonzentration für den jeweiligen Zelltyp und die experimentellen Bedingungen zu bestimmen. Verwenden Sie geeignete Isotypkontrollen und Vitalfarbstoffe, um tote Zellen auszuschließen.
• Validieren Sie die Antikörperspezifität mithilfe CD4-positiver humaner T-Zelllinien (z. B. Jurkat) oder primärer mononukleärer Zellen des peripheren Blutes (PBMCs). Knockout- oder Knockdown-Modelle können als Negativkontrollen dienen.
• Das PE-Konjugat liefert ein starkes Signal für die Oberflächenfärbung. Achten Sie bei der Verwendung von Multicolor-Panels auf eine korrekte Kompensation, insbesondere bei weiteren PE-konjugierten Antikörpern.

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