PE-Kaninchen anti-humaner CD24 monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie - P25063

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD24-Funktion und -Lokalisation

• CD24, auch bekannt als Small Cell Lung Carcinoma Cluster 4 Antigen, ist ein GPI-verankertes Glykoprotein, das vom CD24-Gen kodiert wird. Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen.
• Es spielt eine entscheidende Rolle bei der Zelldifferenzierung in verschiedenen Zelltypen, wobei die Signalgebung durch die Bindung von Lektin-ähnlichen Liganden an CD24-Kohlenhydrate ausgelöst wird, was zur Freisetzung von Second Messengern aus seinem GPI-Anker führt.
• In B-Zellen moduliert CD24 Aktivierungsantworten, fördert die antigenabhängige Proliferation und verhindert die terminale Differenzierung zu antikörperbildenden Zellen. Verwandte Referenzen: PMID:11313396
• CD24 assoziiert mit SIGLEC10, um selektiv Immunantworten auf gefahrenassoziierte molekulare Muster (DAMPs) wie HMGB1, HSP70 und HSP90 zu unterdrücken, was auf eine Rolle bei der Kontrolle von Autoimmunität hindeutet.
• Subzellulär ist CD24 an der Zellmembran lokalisiert, verankert über einen GPI-Rest.
• Die Gewebeexpression erfolgt hauptsächlich auf B-Zellen, findet sich aber auch auf einigen T-Zellen, Erythroleukämie-Zelllinien und kleinzelligen Lungenkarzinom-Linien, was es zu einem Marker für B-Zell-Entwicklungsstadien und bestimmte Krebsarten macht.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung und GPI-Anker-Anheftung, was zu seinem variablen Molekulargewicht (~8-13 kDa, abhängig von Glykosylierung und Isoform) beiträgt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Als PE-konjugierter Antikörper bei 2-8°C vor Licht geschützt lagern und Gefrier-Tau-Zyklen vermeiden, um die Fluorophor-Helligkeit zu erhalten.
• Für die Durchflusszytometrie den Antikörper titrieren, um die optimale Arbeitskonzentration in Ihrem experimentellen System zu bestimmen; eine Startverdünnung von 1:50-1:200 ist für PE-Konjugate üblich, aber Optimierung ist essenziell.
• Fügen Sie geeignete Isotypenkontrollen und Vitalitätsfarbstoffe hinzu, um tote Zellen und unspezifische Bindung auszuschließen.
• Validieren Sie den Antikörper in einer relevanten humanen B-Zelllinie (z.B. Raji, Daudi) oder PBMCs, um das erwartete Oberflächenfärbemuster zu bestätigen; ein Blockierschritt mit normalem Serum der Wirtsspezies kann den Hintergrund reduzieren.
• Da das Immunogen die N-terminale extrazelluläre Domäne (Aminosäuren 1-80) umspannt, wird erwartet, dass der Antikörper das exponierte Epitop auf lebenden Zellen erkennt; berücksichtigen Sie Effekte von Fixierung/Permeabilisierung, wenn er in intrazellulärer Durchflusszytometrie verwendet wird.

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