PE-Kaninchen-anti-humaner-CD185/CXCR5-monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie – P32302

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CXCR5

• CXCR5 ist ein C-X-C-Chemokinrezeptor, der spezifisch an den B-Lymphozyten-Chemoattraktanten (BLC) bindet und die Migration von B-Zellen in die B-Zell-Follikel von Milz und Peyer-Plaques steuert.
• Neben der Chemotaxis könnte er eine regulatorische Rolle bei der Lymphomagenese des Burkitt-Lymphoms (BL) und der Differenzierung von B-Zellen spielen, was seine Bedeutung sowohl für die normale B-Zell-Biologie als auch für die Lymphomagenese unterstreicht.
• Das Protein ist auch als Burkitt-Lymphom-Rezeptor 1 (BLR1), monocytenabgeleiteter Rezeptor 15 (MDR-15) und CD185 bekannt, was den Kontext seiner Entdeckung widerspiegelt.
• Als G-Protein-gekoppelter Rezeptor (GPCR) enthält CXCR5 sieben Transmembrandomänen und überträgt extrazelluläre Signale über die Zellmembran.
• Auf subzellulärer Ebene ist CXCR5 überwiegend in der Zellmembran lokalisiert, was seiner Funktion als Oberflächenrezeptor entspricht.
• Wie in Studien zur Gewebespezifität berichtet, wird es hauptsächlich in reifen B-Zellen und Burkitt-Lymphomzellen exprimiert.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Glykosylierung und Disulfidbrückenbildung, die für die korrekte Faltung und Rezeptorfunktion entscheidend sind.
• Alternatives Spleißen erzeugt Isoformen und könnte möglicherweise die beobachteten Proteingewichte von etwa 36 und 42 kDa erklären.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen umfasst die extrazelluläre N-terminale Domäne (Aminosäuren 1–47) des humanen CXCR5. Die Ausrichtung auf diese Region kann Antikörper hervorbringen, die den nativen Rezeptor auf lebenden Zellen erkennen, wodurch der Antikörper für Anwendungen in der Durchflusszytometrie geeignet ist.
• Für die Durchflusszytometrie sollte der Antikörper titriert werden, um die optimale Arbeitskonzentration für den jeweiligen Probentyp (z. B. PBMCs, kultivierte B-Zell-Linien) zu bestimmen.
• Geeignete Isotypkontrollen und Schritte zur Blockierung von Fc-Rezeptoren sollten eingeschlossen werden, um eine unspezifische Bindung zu minimieren.
• Da CXCR5 auf reifen B-Zellen exprimiert wird, sollte die Expression auf bekannten positiven und negativen Zellpopulationen validiert werden, um die Spezifität zu bestätigen.
• Der Antikörper wird als PE-Konjugat geliefert und eignet sich für die direkte Färbung, ohne dass ein sekundärer Nachweisschritt erforderlich ist.

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