PE-Kaninchen anti-Mensch CD158a/KIR2DL1 monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P43626

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD158a/KIR2DL1

• KIR2DL1, auch bekannt als CD158a, NKAT1 oder p58.1, ist ein killerzell-Immunglobulin-ähnlicher Rezeptor (KIR) aus der Familie der Immunglobuline, der durch extrazelluläre Immunglobulindomänen und eine Transmembranhelix charakterisiert ist.
• Es fungiert als inhibitorischer Rezeptor auf natürlichen Killerzellen (NK-Zellen), erkennt spezifisch bestimmte HLA-C-Allele (z. B. w4 und w6) und unterdrückt die NK-zellvermittelte Zytotoxizität, um die Lyse von Zielzellen zu verhindern.
• Der Rezeptor ist ein transmembranes Glykoprotein mit durch Disulfidbindungen stabilisierten Immunglobulindomänen, einem Signalpeptid und einem zytoplasmatischen Schwanz, der inhibitorische Signale überträgt.
• KIR2DL1 wird hauptsächlich auf der Oberfläche von NK-Zellen exprimiert und spielt eine entscheidende Rolle bei der Immunüberwachung und Selbsttoleranz durch die Überwachung der Expression von MHC-Klasse-I-Molekülen.
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen des Rezeptors, posttranslationale Modifikationen umfassen N-verknüpfte Glykosylierung und die Bildung von Disulfidbindungen, die für die korrekte Faltung und Funktion essenziell sind.
• Subzellulär lokalisiert sich KIR2DL1 an der Zellmembran: seine extrazelluläre Region bindet Liganden auf Zielzellen, während seine intrazelluläre Domäne Phosphatasen rekrutiert, um Aktivierungssignale zu hemmen.
• Die durch Kristallographie aufgelöste dreidimensionale Struktur von KIR2DL1 zeigt wichtige ligandenbindende Schnittstellen und Konformationsänderungen bei der Interaktion mit HLA-C.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für die Durchflusszytometrie titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Konzentration für Ihre spezifische Zellart und experimentellen Bedingungen zu bestimmen, da die Färbeintensität zwischen verschiedenen NK-Zell-Subsets variieren kann.
• Da das Immunogen die extrazelluläre Domäne (Aminosäuren 22–245) umfasst, ist dieser Antikörper für die Oberflächenfärbung von lebenden, unfixierten Zellen geeignet und erfordert keine Permeabilisierung.
• Validieren Sie den Antikörper auf gut charakterisierten NK-Zelllinien oder primären humanen NK-Zellen, um die Spezifität zu bestätigen, da die Expression von KIR2DL1 klonal verteilt und aktivierungsabhängig ist.
• Verwenden Sie geeignete Isotyp-Kontrollen und berücksichtigen Sie bei der Analyse mehrerer KIR-Familienmitglieder mehrfarbige Panels mit sorgfältig ausgewählten Fluorochromen, um Kompensationsartefakte zu minimieren.
• Bei der Anwendung in Funktionsassays beachten Sie, dass die Antikörperbindung die Ligandenerkennung blockieren oder die Rezeptorbindung nachahmen kann; führen Sie einen Vortest in Ihrem System durch, um potenzielle Agonisten-/Antagonistenwirkungen zu bewerten.

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