PE-Konjugierter Kaninchen-Anti-Human CD117/c-Kit monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie - P10721

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD117/c-Kit Funktion und Lokalisation

• CD117, auch bekannt als c-Kit, SCFR oder PBT, ist ein transmembraner Tyrosin-Protein-Kinase-Rezeptor, der durch das KIT-Gen kodiert wird; alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen (UniProt: P10721).
• Der primäre Ligand ist der Stammzellfaktor (SCF/KITLG). Die Ligandenbindung induziert Rezeptordimerisierung und Autophosphorylierung, wodurch nachgeschaltete Signalkaskaden aktiviert werden, die das Überleben, die Proliferation und die Differenzierung von Zellen in der Hämatopoese, Melanogenese, Gametogenese und Mastzellentwicklung regulieren.
• Aktiverter CD117 rekrutiert und phosphoryliert Schlüssel-Adapterproteine und Enzyme wie PIK3R1 (PI3K), GRB2 und PLCG1, was zur Aktivierung der AKT-, RAS/MAPK- und STAT (STAT1, STAT3, STAT5)-Signalwege sowie zur Produktion der Second Messenger DAG und IP3 führt.
• CD117 befindet sich hauptsächlich in der Zellmembran, kann aber auch nach Internalisierung und Transport im Zytoplasma vorkommen.
• Im Hoden wird CD117 in Spermatogonien der Basalschicht und in interstitiellen Leydig-Zellen nachgewiesen, und seine Expression bleibt in ejakulierten Spermatozoen erhalten (auf Proteinebene). Verwandte Referenzen: PMID:20601678
• Das Protein ist stark glykosyliert, enthält extrazelluläre Immunglobulin-Domänen und eine intrazelluläre Kinase-Domäne und wird als Proto-Onkogen klassifiziert; Disulfidbrücken und Phosphorylierung sind wichtige strukturelle und funktionelle Merkmale.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper ist direkt mit PE konjugiert, was ihn für den einstufigen Durchflusszytometrie-Nachweis von CD117 ohne Sekundärantikörper geeignet macht.
• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Region (aa 26–520) von humanem CD117, was auf eine Reaktivität mit dem nativen Oberflächenrezeptor hindeutet.
• Für die Durchflusszytometrie: Titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Konzentration für Ihren spezifischen Zelltyp und Ihr Gerät zu bestimmen; schließen Sie geeignete Isotypenkontrollen und Fc-Rezeptor-Blockierungsschritte ein, um unspezifische Bindung zu minimieren.
• Validieren Sie die Expression in bekannten CD117-positiven humanen Zelllinien (z.B. TF-1, HMC-1) oder primären hämatopoetischen Zellen.
• Da CD117 nach Ligandenstimulation internalisiert werden kann, berücksichtigen Sie den Zeitpunkt von Fixierung und Färbung bei der Analyse aktivierter Zellen.

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