PE-Kaninchen-anti-humanes Calreticulin-monoklonales Antikörper für die intrazelluläre Durchflusszytometrie – P27797

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Calreticulin

• Calreticulin (CALR, auch bekannt als CRP55, Calregulin, ERp60, HACBP und grp60) ist ein hochkonserviertes, kalziumbindendes Chaperon, das hauptsächlich im Lumen des endoplasmatischen Retikulums (ER) lokalisiert ist.
• Es ist ein zentraler Bestandteil des Calreticulin/Calnexin-Zyklus und fördert durch die Bindung an monoglukosylierte N-glykosidische Glykane die Faltung, oligomere Assemblierung und Qualitätskontrolle neu synthetisierter Glykoproteine (PubMed:7876246). Zugehörige Referenzen: PMID:7876246
• Calreticulin interagiert mit der DNA-bindenden Domäne des Glukokortikoidrezeptors (NR3C1) und vermittelt dessen nukleären Export, wodurch die ER-Funktion mit zytoplasmatischen Signalwegen verknüpft wird (PubMed:11149926). Zugehörige Referenzen: PMID:11149926
• Außerhalb des ER ist Calreticulin im Zytosol, auf der Zelloberfläche, in der extrazellulären Matrix und in sekretorischen Vesikeln lokalisiert; außerdem wird es im sarkoplasmatischen Retikulum, in kortikalen Granula und in zytolytischen Granula nachgewiesen, was seine vielfältigen Funktionen widerspiegelt.
• Es ist an der Kalziumhomöostase, der Zelladhäsion und der Regulation der Genexpression beteiligt und wurde mit der Oozytenreifung sowie der Blockade der Polyspermie in Verbindung gebracht.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Acetylierung, Hydroxylierung und eine konservierte Disulfidbindung; das Protein hat ein Molekulargewicht von etwa 48 kDa und enthält ein Signalpeptid, Lektinbindungsdomänen und Metallbindungsstellen.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der C-terminalen Region (Aminosäuren 335–417) des humanen Calreticulins. Vergewissern Sie sich, dass dieses Epitop in Ihrem spezifischen Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokoll für die intrazelluläre Durchflusszytometrie zugänglich ist.
• Da dieser Antikörper PE-konjugiert und für die intrazelluläre Färbung empfohlen ist, sollten Sie die Permeabilisierungsbedingungen optimieren und geeignete Isotypkontrollen einbeziehen, um einen möglichen Hintergrund durch intrazelluläre Fc-Rezeptoren oder unspezifische Bindung zu berücksichtigen.
• Calreticulin wird in mehreren subzellulären Kompartimenten exprimiert. Validieren Sie die Färbespezifität, indem Sie je nach experimentellem Kontext die Lokalisierungsmuster im ER, im Zytosol oder auf der Zelloberfläche vergleichen.
• Für Anwendungen außerhalb der intrazellulären Durchflusszytometrie wird dringend eine Vorprüfung empfohlen, da dieser Antikörper nur für die angegebene Anwendung unter den Bedingungen des Lieferanten validiert ist.

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