PE-kaninchen anti-menschliches C5AR1/CD88 monoklonaler Antikörper für FC - P21730

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von C5AR1

• C5AR1 (C5a Anaphylatoxin-Chemotaxis-Rezeptor 1, auch bekannt als C5a-R, C5aR, CD88) ist ein G-Protein-gekoppelter Rezeptor, der als Rezeptor für das chemotaktische und entzündliche Peptid Anaphylatoxin C5a dient.
• Nach der Bindung von C5a erfährt C5AR1 eine Konformationsänderung, die die Signalübertragung über Guaninnukleotid-bindende Proteine (G-Proteine) auslöst. Es ist hauptsächlich an G(i)/G(o)-Alpha-Untereinheiten (GNAI1 oder GNAO1) gekoppelt, was zur Hemmung der Adenylatcyclase führt. Verwandte Referenzen: PMID:36806352, PMID:37852260
• Die Aktivierung von C5AR1 stimuliert eine Reihe zellulärer Reaktionen einschließlich Chemotaxis, Granulenzyme-Freisetzung, intrazelluläre Calcium-Freisetzung und Superoxidanion-Produktion, was auf eine Beteiligung an Entzündungsprozessen hinweist. Verwandte Referenzen: PMID:10636859, PMID:15153520, PMID:1847994
• Der Ligand C5a interagiert mit mindestens zwei Bindungsstellen an C5AR1: einer hochaffinen Stelle am extrazellulären N-Terminus und einer zweiten Stelle innerhalb der Transmembranregion, die die nachgeschaltete Signalübertragung aktiviert. Verwandte Referenzen: PMID:7622471, PMID:8182049, PMID:9553099
• Subzellulär lokalisiert sich C5AR1 an der Zellmembran und in zytoplasmatischen Vesikeln, was mit seinen Rollen bei der Signaltransduktion und Rezeptortraffickierung übereinstimmt.
• C5AR1 wird posttranslational durch Glykosylierung, Phosphorylierung und Sulfatierung modifiziert und enthält Disulfidbindungen, die für GPCRs charakteristisch sind, wie es in UniProt-Schlüsselwörtern angegeben ist.
• Als Mitglied der Familie der G-Protein-gekoppelten Rezeptoren fungiert C5AR1 als Transduktor in chemotaktischen Signalwegen und wird in proteomischen Studien identifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein synthetisches Peptid hergestellt, das der N-terminalen Region (Aminosäuren 1-100) von humanem C5AR1 entspricht. Für eine optimale Leistung in der Durchflusszytometrie (FC) sollten Sie den Antikörper titrieren, um die passende Arbeitskonzentration für Ihre spezifische Zellart und experimentellen Bedingungen zu bestimmen.
• Aufgrund der Expression des Rezeptors an Zellmembranen und intrazellulären Vesikeln können Permeabilisierungsschritte das Färbemuster beeinflussen; evaluieren Sie bei Bedarf sowohl Protokolle für Oberflächen- als auch für Gesamtfärbung.
• Validieren Sie die Spezifität des Antikörpers mit einer relevanten Positivkontroll-Zelllinie, von der bekannt ist, dass sie C5AR1 exprimiert (z. B. Immunzellen) und einer Negativkontrolle (z. B. rezeptornegative Zellen oder Isotypkontrolle).
• Wenn Sie diesen PE-konjugierten Antikörper in mehrfarbigen Durchflusspanelen verwenden, stellen Sie eine korrekte Kompensation sicher und vermeiden Sie potenzielle spektrale Überlappung mit anderen Fluorophoren.

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