PE Anti-Mouse MHC Class II (I-A/I-E) Monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P18468 / P06342 / Q3U060 / P14435

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von MHC-Klasse-II (I-A/I-E)

• Die I-A- und I-E-Betaketten sind Kernkomponenten der MHC-Klasse-II-Moleküle der Maus (Major Histocompatibility Complex), die von Genen wie H2-Ab1 bzw. H2-Eb1 kodiert werden. Diese Proteine sind entscheidend für die adaptive Immunität, indem sie antigenische Peptide CD4+ T-Helferzellen präsentieren.
• Jedes MHC-Klasse-II-Heterodimer besteht aus einer Alpha- und einer Betakette; dieser Antikörper erkennt Betaketten von beiden I-A- und I-E-Isotypen und ermöglicht so eine breite Detektion der MHC-Klasse-II-Expression.
• Subzellulär sind MHC-Klasse-II-Betaketten Single-Pass-Typ-I-Membranproteine, die zwischen der Plasmamembran und endosomalen Kompartimenten zirkulieren, wo das Peptid-Loading stattfindet, bevor sie an die Zelloberfläche transportiert werden.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen die Bildung von Disulfidbrücken im extrazellulären Bereich, N-verknüpfte Glykosylierung und Ubiquitinierung, welche die Protein-Stabilität und den Umsatz von MHC II regulieren.
• Die Moleküle werden innerhalb der Immunglobulin-Superfamilie klassifiziert und besitzen eine charakteristische Struktur: ein Signalpeptid, zwei extrazelluläre Domänen (α1/β1 und α2/β2), eine Transmembranhelix und einen kurzen zytoplasmatischen Schwanz.
• Als zentrale Vermittler der adaptiven immunologischen Synapse überbrücken MHC-Klasse-II-Moleküle das angeborene und das adaptive System und gewährleisten eine spezifische T-Zell-Aktivierung und Immunüberwachung.
• Die Gewebeexpression erfolgt vorwiegend auf professionellen antigenpräsentierenden Zellen (dendritische Zellen, Makrophagen, B-Zellen) und thymischen Epithelzellen, kann aber durch entzündliche Reize auch auf anderen Zelltypen induziert werden.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Protein, das I-A/I-E-Sequenzen umfasst; für ein ähnliches Reagenzdesign können Konstrukte der Volllänge oder der extrazellulären Domäne helfen, die Erkennung der nativen Konformation zu bewahren.
• Dieser PE-konjugierte Antikörper ist für die Durchflusszytometrie bestimmt. Titrieren Sie den Antikörper in Ihrem relevanten Zellsystem und fügen Sie einen geeigneten Isotyp-Kontroll sowie einen Fc-Rezeptor-Blockierungsschritt hinzu, um den Hintergrund zu minimieren.
• Der Antikörper zeigt Kreuzreaktivität mit der Maus; eine Validierung wird empfohlen, wenn Proben von anderen Nagetierarten getestet werden.
• Die vorhergesagten Molekulargewichte der Ziel-Betaketten reichen von 26 kDa bis 32 kDa. Beachten Sie, dass der Antikörper nicht für den denaturierenden Western Blot validiert wurde; bei einem Versuch ist möglicherweise eine Optimierung unter nativen oder nicht-reduzierenden Bedingungen erforderlich.
• Da der Antikörper mehrere Beta-Ketten-Varianten erkennt, dient er als Pan-MHC-Klasse-II-Werkzeug. Überprüfen Sie die Expressionsmuster im spezifischen Mausstamm oder der verwendeten Zelllinie.

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