PE-konjugierter monoklonaler Anti-CD94-Antikörper für die Durchflusszytometrie – O54707

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD94

• CD94, kodiert durch das Klrd1-Gen (auch bekannt als „Killer cell lectin-like receptor subfamily D member 1“), ist ein Transmembranprotein, das sowohl in inhibitorischen als auch in aktivierenden Imm rezeptorkomplexen auf NK-Zellen und bestimmten T-Zell-Subpopulationen als ligandbindende Untereinheit fungiert.
• In Verbindung mit KLRC1 (NKG2A) erkennt CD94 MHC-E, das mit Selbstpeptiden beladen ist, und übermittelt über ITIMs inhibitorische Signale, die Phosphatasen rekrutieren und dadurch Aktivierungssignale abschwächen. Auf diese Weise reguliert CD94 die Zytotoxizität von NK-Zellen und verhindert Autoimmunität.
• In Verbindung mit KLRC2 (NKG2C) erkennt CD94 MHC-E, das mit von MHC-G abgeleiteten Peptiden beladen ist, und übermittelt über den Adapter DAP12 aktivierende Signale, die bei adaptiven NK-Zell-Antworten und der maternalen-fetalen Toleranz eine Rolle spielen.
• CD94 fungiert als Immun-Checkpoint-Molekül. In Tumormikroumgebungen mit hoher MHC-E-Expression kann der inhibitorische KLRD1-KLRC1-Komplex zur Erschöpfung von NK- und T-Zellen beitragen, wodurch er zu einem Ziel der immunonkologischen Forschung wird.
• Das Protein ist auf der Zellmembran lokalisiert und durch eine C-Typ-Lektin-ähnliche Domäne, Disulfidbrücken, Glykosylierung und eine Transmembranhelix gekennzeichnet. Diese Merkmale sind für seine strukturelle Integrität und Ligandenbindung von Bedeutung.
• Die durch CD94 vermittelte Überwachung ermöglicht es Lymphozyten, die Expression von MHC-Klasse-I-Molekülen zu kontrollieren und gesunde Zellen von solchen zu unterscheiden, deren MHC-I-Expression aufgrund einer Infektion oder Transformation herunterreguliert ist.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein rekombinantes Fusionsprotein erzeugt, das der extrazellulären Region (Aminosäuren 59–179) des murinen CD94 entspricht, was auf eine Erkennung der ligandbindenden Domäne hindeutet. Stellen Sie sicher, dass er sich für den Nachweis von CD94 auf der Zelloberfläche mittels Durchflusszytometrie unter nicht permeabilisierenden Bedingungen eignet.
• Für die Durchflusszytometrie sollte der Antikörper titriert werden, um die optimale Färbekonzentration zu bestimmen. Verwenden Sie geeignete Isotypkontrollen und blockieren Sie Fc-Rezeptoren, um eine unspezifische Bindung an murine Immunzellen zu minimieren.
• CD94 wird auf NK-Zellen und einigen T-Zell-Subpopulationen exprimiert. Ziehen Sie eine Ko-Färbung mit Markern wie NK1.1, CD3 oder KLRG1 in Betracht, um spezifische Lymphozytenpopulationen in Mausproben aufzulösen.
• Da CD94 gemeinsam mit inhibitorischen oder aktivierenden Partnern exprimiert werden kann, können funktionelle Studien davon profitieren, diesen Antikörper mit Anti-NKG2A oder Anti-NKG2C zu kombinieren, um Immun-Checkpoint- und Aktivierungswege zu unterscheiden.
• Fixierungs- und Permeabilisierungsschritte können die Epitoperkennung verändern. Validieren Sie daher die Leistung des Antikörpers unter Ihrem spezifischen Versuchsprotokoll, insbesondere wenn eine intrazelluläre Färbung erforderlich ist.

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