Pan-Akt Kaninchen polyklonaler Antikörper für WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P31749/P31751/Q9Y243

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Pan-Akt (AKT1/AKT2/AKT3)

• AKT1 ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die zur AKT-Kinase-Familie gehört (einschließlich AKT1, AKT2, AKT3) und den Stoffwechsel, die Proliferation, das Zellüberleben, das Wachstum und die Angiogenese reguliert. Verwandte Referenzen: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• Sie vermittelt die insulininduzierte Glukoseaufnahme durch Translokation von SLC2A4/GLUT4 und reguliert die Glykogensynthese durch Hemmung von GSK3A und GSK3B.
• AKT1 fördert das Zellüberleben durch Phosphorylierung von MAP3K5/ASK1 an „Ser-83“, wodurch die durch oxidativen Stress induzierte Apoptose gehemmt wird. Verwandte Referenzen: PMID:11154276
• Sie aktiviert die mTORC1-Signalgebung durch Phosphorylierung von TSC2, was zur Proteinsynthese und zum Zellwachstum führt. Verwandte Referenzen: PMID:12150915, PMID:12172553
• AKT1 phosphoryliert FOXO-Transkriptionsfaktoren (FOXO1, FOXO3, FOXO4), was zu ihrer zytoplasmatischen Retention und Hemmung ihrer pro-apoptotischen Funktionen führt. Verwandte Referenzen: PMID:10358075
• Sie reguliert die NF-kappa-B-abhängige Transkription und die CREB1-Aktivität positiv und verstärkt die Expression von pro-überlebensfördernden Genen (z. B. BCL2, MCL1). Verwandte Referenzen: PMID:9829964
• Subzellulär lokalisiert sich AKT1 im Zytoplasma, im Zellkern, in der Zellmembran und im intermembranen Raum der Mitochondrien, was seine vielfältigen Signalrollen widerspiegelt.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung (Aktivierung), Acetylierung, Glykoprotein und Ubiquitinierung, wie von den UniProt-Schlüsselwörtern hervorgehoben.
• AKT1 ist in menschlichen Geweben ubiquitär exprimiert, mit erhöhten Spiegeln in Prostata- und Brustkrebsen, insbesondere der phosphorylierten Tyr-176-Form während der Progression von Brustkrebs.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen erstreckt sich über eine konservierte Region (aa 311-480) von menschlichem AKT1, AKT2 und AKT3, was eine breite pan-Akt-Reaktivität über die AKT-Familie hinweg vorhersagt.
• Für das Western Blotting sollten mehrere Bänder berücksichtigt werden, die den AKT-Isoformen entsprechen: ~48 kDa (AKT1), ~55 kDa (AKT2) und ~51/54 kDa (AKT3). Validieren Sie die Bandspezifität mithilfe von isoformspezifischen Kontrollen oder siRNA-Knockdown.
• Für die Immunfluoreszenz/Immunhistochemie ist Methanol- oder Formaldehyd-Fixierung in der Regel geeignet; jedoch kann eine Permeabilisierung für intrazelluläre Ziele erforderlich sein.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, ist mit Chargen-zu-Chargen-Schwankungen im Titer und in der Affinität zu rechnen; es ist ratsam, den Antikörper für jede neue Charge und Anwendung zu titrieren.
• Verwenden Sie für die Immunpräzipitation Protein A/G-Perlen für eine optimale Erfassung von Kaninchen-IgG.
• ELISA-Anwendungen erfordern möglicherweise einen optimierten Beschichtungspuffer und ein Nachweissystem; Testen Sie mehrere Konzentrationen, um das Signal-Rausch-Verhältnis zu maximieren.

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