Pan-Akt Kaninchen mAb für Western Blot, IP, IF, IHC-P, ELISA - P31749 / P31751 / Q9Y243

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Pan-Akt Funktion und Lokalisation

• AKT1 ist eine von drei eng verwandten Serin/Threonin-Kinasen (AKT1/PKBα, AKT2/PKBβ, AKT3/PKBγ), die hohe strukturelle Ähnlichkeit und überlappende Substratspezifitäten aufweisen. Gemeinsam regulieren sie wichtige zelluläre Prozesse.
  Verwandte Referenzen: PMID:11882383 PMID:15526160 PMID:15861136
• Als nachgeschaltetes Molekül unterhalb von PI3K vermittelt AKT die Signalübertragung von Insulin und Wachstumsfaktoren (IGF1, EGF, PDGF) zur Steuerung von Stoffwechsel, Zellwachstum, Proliferation, Überleben und Angiogenese.
  Verwandte Referenzen: PMID:12176338 PMID:12964941 PMID:11882383 PMID:15526160 PMID:15861136
• AKT fördert das Zellüberleben durch direkte Phosphorylierung und Inaktivierung pro-apoptotischer Faktoren, einschließlich MAP3K5/ASK1 (Ser83) und BAD, sowie durch Aktivierung von Transkriptionsfaktoren wie CREB1 und NF-κB.
  Verwandte Referenzen: PMID:11154276 PMID:10926925 PMID:9829964
• Durch Phosphorylierung von TSC2 und DEPDC5/CASTOR1 stimuliert AKT die mTORC1-Aktivität, fördert die Proteinsynthese und hemmt die Autophagie.
  Verwandte Referenzen: PMID:12150915 PMID:12172553 PMID:31548394 PMID:33594058
• AKT phosphoryliert FOXO1, FOXO3 und FOXO4, was deren Bindung an 14-3-3-Proteine und zytoplasmatische Retention auslöst und dadurch die Transkription pro-apoptotischer Gene unterdrückt.
  Verwandte Referenzen: PMID:10358075
• Das Protein lokalisiert sich im Zytoplasma, Zellkern, an der Zellmembran und im intermembranären Raum der Mitochondrien, was kontextabhängige Signalübertragung ermöglicht; es ist ubiquitär exprimiert und wird häufig in Krebserkrankungen wie Prostatakarzinom und Brustkarzinom überaktiviert.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das erwartete Molekulargewicht für Pan-Akt beträgt etwa 56 kDa; abhängig von Zelllinie und Behandlungsbedingungen kann eine einzelne Bande oder mehrere Banden entsprechend verschiedener Isoformen beobachtet werden.
• Für Western Blotting (WB) empfehlen wir, mit einer Verdünnung von 1:1000 zu beginnen und die Bedingungen basierend auf der Zielmenge in Ihrer Probe zu optimieren.
• Für Immunpräzipitation (IP) verwenden Sie 2–5 µg Antikörper pro 500 µg Gesamtproteinlysat; validieren Sie mit geeigneten Positiv- und Negativkontrollen.
• Bei Immunfluoreszenz (IF/ICC) und Immunhistochemie (IHC-P) optimieren Sie Fixierung und Permeabilisierung und testen Sie Verdünnungen zwischen 1:50 und 1:200.
• Für ELISA-Anwendungen ist möglicherweise eine Paarung mit einem geeigneten Detektionsantikörper erforderlich; stellen Sie sicher, dass der Antikörper das native Protein unter den Assaybedingungen erkennt.
• Kreuzreaktivität wurde für Akt von Mensch, Maus und Ratte nachgewiesen; bei Verwendung anderer Spezies überprüfen Sie die Sequenzhomologie in der Immunogenregion (Reste 1-123 von menschlichem Akt1).
• Der Antikörper erkennt alle drei AKT-Isoformen; für isoformspezifische Studien bestätigen Sie die Spezifität mit genetischen Kontrollen oder spezifischen Inhibitoren.

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