p38 MAPK Kaninchen-pAb - Q16539

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: p38 MAPK-Funktion und -Lokalisierung

• p38 MAPK (Mitogen-activated protein kinase 14, MAPK14) ist eine Serin/Threonin-Kinase und eine zentrale Komponente des p38-MAP-Kinase-Signaltransduktionswegs, der durch proinflammatorische Zytokine und verschiedene Stressreize aktiviert wird, um zelluläre Antworten zu regulieren.
• Nach der Aktivierung phosphoryliert MAPK14 die downstream-Kinasen RPS6KA5/MSK1 und RPS6KA4/MSK2, die wiederum Transkriptionsfaktoren (CREB1, ATF1, NF-kappa-B, STAT1/3) und Histon H3 direkt phosphorylieren, was die Chromatin-Umbildung und die Expression von Immediate-Early-Genen fördert. Verwandte Referenzen: PMID:9687510 PMID:9792677
• MAPK14 steuert die Genexpression post-transkriptionell über MAPKAPK2/MK2, MAPKAPK3/MK3 und MKNK1/2. MKNK1 und MKNK2 regulieren die Proteinsynthese durch Phosphorylierung des Initiationsfaktors EIF4E2. Verwandte Referenzen: PMID:11154262
• Die Kinase interagiert mit Casein-Kinase II, was zu ihrer Autophosphorylierung und anschließenden Phosphorylierung von TP53/p53 führt. Im Zytoplasma reguliert sie den Proteinumsatz durch Vermittlung der proteasomabhängigen Degradation von CFLAR und durch Phosphorylierung des Ubiquitin-Ligasen SIAH2. Verwandte Referenzen: PMID:10747897 PMID:17003045
• MAPK14 moduliert die Endozytose: Die clathrin-vermittelte EGFR-Internalisierung hängt von ihrer Phosphorylierung von EGFR und RAB5A-Effektoren ab. Sie reguliert auch die Autophagie durch Beeinträchtigung des ATG9-Traffics und steuert das Ektodomänen-Shedding durch Phosphorylierung von ADAM17, was die EGFR-Signalgebung aktiviert. Verwandte Referenzen: PMID:16932740 PMID:19893488 PMID:20188673
• Der p38-MAPK-Weg ist für die stressinduzierte Zellzyklusarrest essentiell; MAPK14 phosphoryliert CDC25B und CDC25C, erleichtert die 14-3-3-Bindung und die G2-Verzögerung nach UV-Bestrahlung. Bei DNA-Schäden phosphoryliert es TIAR, um den Abbau der GADD45A-mRNA zu verhindern. Verwandte Referenzen: PMID:11333986 PMID:20932473
• MAPK14 ist vorwiegend zytoplasmatisch, transloziert aber nach Aktivierung in den Zellkern. Es wird durch mehrere posttranslationale Ereignisse modifiziert, einschließlich Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitin-Konjugation, die seine Aktivität und Interaktionen feinabstimmen.
• Alternatives Spleißen generiert die Isoformen MXI2 und EXIP. MXI2 wird durch Mitogene und oxidativen Stress aktiviert, phosphoryliert ATF2 jedoch schlecht; EXIP könnte eine Rolle beim frühen Apoptose spielen. p38 alpha ist weitgehend im Gehirn, Herzen, in der Plazenta, der Bauchspeicheldrüse und der Skelettmuskulatur exprimiert, mit niedrigeren Werten in Lunge, Leber und Niere. MAPK14 ist auch ein Ziel mikrobieller Virulenzfaktoren; M.tuberculosis EsxA phosphoryliert und hemmt die IFN-gamma-Produktion in T-Zellen. Verwandte Referenzen: PMID:21586573

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einer Sequenz innerhalb der Aminosäuren 261-360 des menschlichen p38 MAPK. Eine Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde berichtet; überprüfen Sie jedoch die Spezifität in Ihrem eigenen experimentellen System.
• Das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt ca. 41 kDa; ein Band in dieser Größenordnung wird beim Western Blot erwartet. Zusätzliche Bänder können Isoformen oder posttranslational modifizierte Formen darstellen.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) sollten Sie die Antigen-Retrieval und die Verdünnung des Primärantikörpers für Ihren Gewebetyp optimieren.
• Bei der Immunfluoreszenz/ICC ist eine angemessene Permeabilisierung empfehlenswert, da sich p38 MAPK sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern befindet.
• Wenn Sie diesen Antikörper in ELISA oder anderen Anwendungen verwenden, fügen Sie geeignete positive und negative Kontrollen hinzu, um die Leistung zu bestätigen.

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