OGT Kaninchen pAk für WB - O15294

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: OGT-Funktion und -Lokalisierung

• OGT (UDP-N-Acetylglucosamin--Peptid N-Acetylglucosaminyltransferase 110 kDa Untereinheit) ist die katalytische Untereinheit, die ein einzelnes N-Acetylglucosamin (GlcNAc) von UDP-GlcNAc auf Serin- oder Threoninreste von Zielproteinen überträgt und so eine beta-verknüpfte O-GlcNAc-Modifikation bildet, die mit Phosphorylierung konkurriert und die Proteinfunktion, -stabilität und -interaktionen reguliert. Verwandte Referenzen: PMID:12150998, PMID:15361863, PMID:19451179
• Sie glykosyliert eine Vielzahl von zytoplasmatischen und nukleären Substraten – einschließlich Histone, Kinasen und Transkriptionsfaktoren – und beeinflusst dadurch die Insulinsignalisierung, Glykolyse, Chromatin-Remodelling und die zirkadianen Rhythmen. Verwandte Referenzen: PMID:19451179, PMID:20200153, PMID:21285374
• Im Kern wird OGT über TET-Proteine an CpG-reiche Transkriptionsstartstellen rekrutiert, um Histon H2B bei Ser‑112 zu O-GlcNAcylieren, was sich direkt auf die Chromatinarchitektur und die Genexpression auswirkt. Verwandte Referenzen: PMID:22121020, PMID:23353889
• OGT stabilisiert EZH2 durch O‑GlcNAcylierung bei Ser‑75, was die Ablagerung von H3K27me3 durch den PRC2-Komplex fördert und die epigenetische Silencierung verstärkt. Verwandte Referenzen: PMID:24474760
• Die O-GlcNAcylierung von RPTOR und FNIP1 durch OGT verknüpft den Nährstoffstatus mit der mTORC1-Aktivierung und positioniert OGT als kritischen metabolischen Sensor. Verwandte Referenzen: PMID:30699359, PMID:37541260
• Neben seinen zytoplasmatischen und nukleären Funktionen induziert eine mitochondrial gezielte Isoform (mOGT) Apoptose, und die OGT-Aktivität moduliert die Autophagie via ATG4B-Glykosylierung. Verwandte Referenzen: PMID:27527864
• OGT ist stark in der Bauchspeicheldrüse exprimiert, mit niedrigeren Spiegeln in Skelettmuskel, Herz, Gehirn und Plazenta; es wandert zwischen dem Kern, Zytoplasma, den Mitochondrien und Membrankompartimenten, was seine pleiotropen Funktionen widerspiegelt. Mutationen in OGT sind mit X-chromosomaler geistiger Behinderung (MRX106, XLID106) verbunden.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 510–699 von menschlichem OGT (NP_858058.1), was einen Teil der C-terminalen katalytischen Domäne und TPR-Wiederholungen abdeckt; dieses Design zielt auf einen Bereich ab, der zwischen Mensch, Maus und Ratte konserviert ist, was die beschriebene Kreuzreaktivität unterstützt.
• Für den Western Blot (WB) wird ein dominantes Band bei ~117 kDa erwartet; zusätzliche Bands können aufgrund von O‑GlcNAcylierten Proteoformen oder der berichteten 78 kDa mitochondrialen Isoform auftreten. Validieren Sie mit geeigneten positiven Kontrollen.
• Bei der Immunhistochemie (IHC‑P) und der Immunfluoreszenz (IF/ICC) sollten Sie Antigen-Retrieval-Schritte in Betracht ziehen und die subzellulären Verteilungsmuster (Kern, Zytoplasma, Mitochondrien) gegenüber bekannten Lokalisationsdaten bestätigen.
• Die Verwendung im ELISA kann eine Optimierung des Beschichtungsantigens und des Nachweissystems erfordern; der Antikörper kann mit geeigneten sekundären Anti-Kaninchen-Reagenzien gepaart werden.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, sollte die Chargen-zu-Chargen-Konsistenz für kritische Anwendungen überwacht werden; führen Sie eine interne Qualifikation durch, wenn Sie zwischen Chargen oder Assay-Formaten wechseln.

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