NPY Kaninchen mAb für Western Blot, Immunfluoreszenz, Immunhistochemie, ELISA - P01303

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von NPY

• Neuropeptid Y (NPY), auch bekannt als PYY4, ist ein 36-Aminosäuren-Peptid der Pankreaspolypeptid-Familie, das vom NPY-Gen (GenID: 4852) kodiert wird. Es ist eines der am häufigsten vorkommenden und weit verbreiteten Neuropeptide im Säugetiernervensystem.
• NPY wirkt als hochaffiner Ligand für die G-Protein-gekoppelten Rezeptoren NPY1R und NPY2R, löst eine Hemmung der Adenylatzyklase und einen Anstieg des intrazellulären Ca²⁺-Spiegels aus (PubMed:1321422, PubMed:7592910, PubMed:35165283, PubMed:38882210). Zugehörige Referenzen: PMID:1321422 PMID:7592910 PMID:35165283 PMID:38882210
• Durch diese Signalgebung stimuliert NPY zentral die Nahrungsaufnahme und reguliert die Energiehomöostase, und moduliert peripher die Kolon-Ionensekretion und die Kontraktilität der glatten Muskulatur.
• NPY ist überwiegend in sekretorischen Vesikeln lokalisiert, insbesondere in großen dichten Kernvesikeln von Neuronen, und wird nach Stimulation freigesetzt, wo es als Neuromodulator und Hormon wirkt. Es kommt auch in chromaffinen Zellen der Nebennierenmark vor.
• Das NPY-Präproprotein wird an dibasischen Stellen proteolytisch gespalten und am C-Terminus amidiert, um das reife, biologisch aktive Peptid zu generieren.
• Schlüsselwörter für NPY umfassen Neuropeptid, Amidierung, Spaltung an Paaren basischer Reste, Phosphoprotein, zytoplasmatisches Vesikel und sezerniert, was seine Synthese-, Verarbeitungs- und Freisetzungswege widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid abgeleitet von menschlichem NPY, daher erkennt der Antikörper wahrscheinlich ein lineares Epitop. Es wird erwartet, dass er gut bei denaturierenden Anwendungen wie dem Western Blot funktioniert.
• Für WB verwenden Sie Lysate aus Gehirn, Hypothalamus oder Darm. NPY ist ein kleines Peptid (ca. 11 kDa); stellen Sie sicher, dass Sie niedrigprozentige oder Gradientengele und geeignete Proteinstandards verwenden. Erwägen Sie die Zugabe von Proteaseinhibitoren, um Abbau zu verhindern.
• Für Immunfluoreszenz (IF) und Immunhistochemie (IHC) kann Antigen-Retrieval das Signal verstärken. Fixierungsmethoden (z. B. 4% PFA) sind kompatibel, validieren Sie dies aber in Ihrem spezifischen Gewebe, da NPY ein sezerniertes und schnell abbaubares Peptid ist.
• Im ELISA kann der Antikörper für Capture oder Detektion verwendet werden, aber die Paarung mit einem anderen NPY-Antikörper für Sandwich-ELISA erfordert empirische Optimierung.

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